产地类别 | 进口 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
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分子克隆和质粒载体构建服务
产品品牌 :
分子克隆和质粒载体构建服务 | 实验技术服务
测序实验流程 :
分子克隆的相关载体 : DNA 的 片段的克隆需要合适的载体,载体或是质粒,或是噬菌体,或是病毒,通常大多经过人工改造。作为载体必须具备两条件 :- 是该载体在细胞内必须能自主复制, 即必须具备复制原点 ; 二是该载体必须具备适合的酶切位点,且这些酶切位点不在复制原点区域内。以上两条,保证了载体的可繁殖性和可利用性。为了便于获得阳隆克隆,载体上常有筛选标记,如对抗菌素的抗性,某些基因产物的显色反应等。
服务要求 :
1 、请以 邮件 等形式告知我们服务的主要目的及具体要求。
2 、提供外源 DNA 的来源及背景资料。 DNA 来源包括 : PCR 扩增产物 ; RT - PCR 扩增产物 ; 从其它质粒上酶切得到的 DNA 的 片段等。
3 、提供 DNA 的 片段的电泳照片 , 并请标明 Marker 有浓度。
4 、提供载体来源与背景资料。
5 、注明克隆使用的酶切位点以及是否需要平端连接等。
相关材料说明 :
1 、对于实验材料中涉及病原体等危险材料不接受。
2 、实验中涉及的碱基序列请以 邮件 的形式发到我中心。
3 、实验中的使用载体要尽量提供背景资料 : ( 质粒大小, 抗性,拷贝数,多克隆位点等 ) 如果是商品化载体,请您提供生产厂家及标准名称 ; 如果所提供载体是您自己构建的请注明大体结构情况。
4 、我中心可以提供常用的如 ( 氨苄青霉素,氯霉素,卡那霉素 ) 以外的抗生素需您提供。
5 、您自己提供的引物如果为干品,请您标注具体的 OD 数,如果是液体态,请您标明浓度。
6 、可以用甘油菌和穿刺菌形式邮寄菌体。
( 同时提供相应的质粒 ) ; 如果提供质粒,则质粒的量 建议 在 4ug 以上 ; 如果提供的是 PCR 产物,则 PCR 产物量 建议 好在 5u 以上 (并 附上电泳图 )
7、 用于提取 RNA/DNA 的材料要新鲜。采样时应首先在液氮中速冻,保存在 - 80 度的冰箱中,使用干冰运输。
结果提供 :
1 、相关的实验说明和相关的酶切图片。
2 、测序的结果。
3 、构建好的载体和菌液各 - 份。
4 、如有鉴定的客户提供 PCR 鉴定图片。