胶原诱导小鼠关节炎模型构建

一、传统CIA模型构建步骤（基于II型胶原蛋白）

1. 材料准备：

• II型胶原蛋白：溶解于醋酸（如5 mg胶原溶于10 mM醋酸，4℃过夜溶解） 。

• 佐剂：与wan全弗氏佐剂（CFA）等体积混合，冰浴超声乳化（2000 Hz），形成乳白色乳化液（现用现配） 。

2. 免疫注射：

• shou次免疫：皮下注射乳化液至小鼠尾根部远端（剂量100 μl/只，含200 μg胶原），注射后观察局部反应 。

• 加强免疫：shou次免疫后第21天，于原注射部位近端再次注射等量乳化液 。

3. 模型评估：

• 临床症状：shou次免疫后约27天出现爪部发红，35天左右出现严重肿胀、关节僵硬（评分标准：0-4分，根据肿胀程度分级） 。

• 病理检测：通过HE染色观察滑膜增生、炎性细胞浸润、软骨破坏等 ，或通过X光、MRI评估骨质侵蚀 。

4. 适用品系：

• 敏感品系包括DBA/1、B10.RIII等，建议使用7-8周龄小鼠 。

二、胶原抗体诱导模型（CAIA）的优化方法

1. 原理与优势：

• 直接注射抗II型胶原单克隆抗体合剂（如A2-10、F10-21等），联合低剂量LPS（脂多糖），绕过自身抗体生成，快速诱导关节炎（3-5天发病） 。

• 优点：

• 适用于CIA不敏感品系（如C57BL/6、BALB/c）及基因敲除小鼠 。

• 发病率接近100%，病理特征与人类RA高度相似 。

2. 操作要点：

• 抗体与LPS剂量：低剂量抗体合剂（如5-克隆抗体）联合LPS注射，减少不良反应 。

• 评估：HE染色显示滑膜增生、炎性细胞浸润及软骨破坏（图2示例） 。

三、注意事项与对比

1. 品系选择：

• CIA依赖MHC单倍型（如DBA/1），而CAIA适用于更广品系（包括T/B细胞缺陷小鼠） 。

2. 模型差异：

• 周期：CIA需35天以上，CAIA仅需数天至2周 。

• 成本：CAIA试剂（单克隆抗体）成本较高 。

3. 伦理与操作规范：

• 需遵守动物福利，定期监测体重和活动能力，避免过度应激 。

四、总结

• CIA模型：适合研究自身免疫反应，模拟RA慢性病程，但周期长、品系限制多 。

• CAIA模型：适用于快速筛选抗炎药物或基因研究，尤其对C57BL/6等品系效果xian著