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精品网站在线免费观看 可见分光光度计的工作原理

时间:2025/6/11阅读:61
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一、基本原理:光的吸收与朗伯 - 比尔定律

光吸收的本质

当可见光(波长范围约 400-760nm)通过被测物质的溶液时,溶液中的分子或离子会选择性吸收特定波长的光,导致光的强度减弱。物质对光的吸收程度与物质的浓度、液层厚度等因素相关。

二、仪器结构与工作流程

1. 核心组件及功能

组件功能描述

光源发射连续可见光,常用钨灯(覆盖 320-2500nm,适用于可见光谱段)。

单色器将复合光分解为单色光,通过棱镜或光栅实现波长选择,确保入射光为单一波长。

比色皿盛放被测溶液,材质为玻璃(适用于可见光),液层厚度通常为 1cm。

检测器如光电管或光电倍增管,将光信号转换为电信号,测量透射光强度。

信号处理与显示系统放大电信号并转换为吸光度或浓度值,通过显示屏输出结果。

三、定量分析步骤与应用逻辑

样品预处理

将被测物质溶解或反应生成能吸收可见光的化合物(如显色反应),确保溶液均匀透明。

波长选择

选择被测物质的最大吸收波长(λmax)作为测量波长,此时灵敏度最高,误差最小。例如,测定铁离子时,常通过显色反应生成红色络合物,选择 510nm 波长测量。

标准曲线绘制

配制一系列已知浓度的标准溶液,测量其吸光度,以浓度为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线,确定线性关系。

样品测量与计算

测量样品溶液的吸光度,通过标准曲线或朗伯 - 比尔定律计算样品浓度。

四、关键影响因素与注意事项

溶液状态

溶液需均匀无浑浊,否则颗粒会散射光,导致吸光度测量偏差。

波长准确性

单色器波长校准需精准,若波长偏移,会导致摩尔吸光系数变化,影响浓度计算精度。

比色皿误差

比色皿材质、厚度一致性及清洁度需严格控制,不同比色皿间的透光率差异会引入误差。

环境与仪器稳定性

光源强度波动、检测器灵敏度变化或温度波动,均可能影响测量重复性。

五、应用场景与行业实例

化学分析:水质中重金属(如铜、铁)含量测定、食品中添加剂(如亚硝酸盐)检测。

生物医药:蛋白质浓度测定(Bradford 法、Lowry 法)、药物含量分析。

环境监测:废水 COD(化学需氧量)、氨氮浓度的快速检测。

工业生产:化工原料纯度分析、染料浓度控制等。


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