因为紫外吸收测试的时候需要测的是光线通过比色皿前后的差别，光是直线的，所以两面透光就够了。而荧光测试的需要一束激光照在比色皿上，然后在另外一边检测溶液的发光。
由于光是直线传播的，所以检测器不能在激光源的对面放置（如果放在光源的对面，检测的就是光源的光谱），事实上检测器，光源和比色皿之间是90度角的关系，所以荧光比色皿需要四面全透。
荧光光度计收集的是受激分子发射的光谱。为了避免激发光，反射光进入检测器而造成误差，入射光源和检测器的方向垂直。
由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发出荧光，荧光经过滤过和反射后，被光电倍增管所接受，然后以图或数字的形式显示出来。
不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征，这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱；，因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。
