（1）材料准备
牛型提纯结核菌素、酒精棉、卡尺、1～2．5ml注射器、针头、工作服、帽、口罩、胶鞋、记录表、线手套等。如果冻干菌素，还需准备稀释用注射用水或灭菌的生理盐水和带胶塞的灭菌小瓶。

（2）操作方法
①注射部位及术前处理。将牛只编号后在颈侧中部上1／3处剪毛（或提前一天剃毛），3个月以内的犊牛也可在肩胛部进行，直径约lOcm，用卡尺测量术部中央皮皱厚度，做好记录。如术部有变化时，应另选部位或在对侧进行。

②注射剂量。不论大小牛只，一律皮内注射1万单位。即将牛型提纯结核菌素稀释成每毫升含10万单位后，皮内注射0．1ml。如用2．5ml注射器，应再加等量注射用水皮内注射0．2ml。冻干菌素稀释后应当天用完。

③注射方法。先以75％酒精消毒术部，然后皮内注入定量的牛型提纯结核菌素，注射后局部应出现小泡，如注射有疑问时，应另选15cra以外的部位或对侧重作。

④注射次数和观察反应。皮内注射后经72h判定，仔细观察局部有无热痛、肿胀等炎性反应，并以卡尺测量皮皱厚度，作好详细记录。对疑似反应牛应即在另一侧以同一批菌素同一剂量进行第二回皮内注射，再经72h后观察反应。如有可能，对阴性反应和疑似反应牛，于注射后96h和120h再分别观察一次，以防个别牛出现较晚的迟发型变态反应。

⑤结果判定。
阳性反应 局部有明显的炎性反应。皮厚差等于或大于4mm以上者，其记录符号为（+）。对进出口牛的检疫，凡皮厚差大于2mm者，均判为阳性。
疑似反应 局部炎性反应不明显，皮厚差在2，1～3．9mm间，其记录符号为（±）。
阴性反应 无炎性反应。皮厚差在2mm以下，其记录符号为（一）。

⑥凡判定为疑似反应的牛只，于*次检疫30天后进行复检，其结果仍为可疑反应时，经30～45天后再复检，如仍为疑似反应，应判为阳性。