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技术文章

炭疽免疫电化学发光技术

阅读:512          发布时间:2011-7-6

化学发光指在氧化过程中,有一中间产物或终末产物,因能吸收能量而处于激发状态,并以化学发光的形式放出能量。化学发光免疫分析的基本原理是将发光剂的衍生物加到免疫反应体系中,取代放射性同位素、酶、荧光等标记物,zui后通过某种仪器测量反应过程中产生光子的多寡,从而推算被测物质的量。

ECL一般采用Ru(bpy)2+3、TPA作为氧化还原剂。加强的免疫电化学发光技术(1ECL)用于细菌的检测。与常规夹心免疫方法不同的是,该法采用直接的夹心免疫;与常规化学发光及荧光技术相比,其主要优点是信噪比高,发光信号易控制。典型的ECL反应中,甚至在生物样品存在时,因无荧光激活过程也没有荧光干扰,且电动势易控制相关ECL光子强度,与反应时间和探针浓度无关。但也存在顺磁珠非特异性吸附及某些化学物质干扰化学反应造成假阳性的现象。

Gatto Menking等报道用ECL检测炭疽芽孢杆菌,敏感性达100个/ml;IECL具有高度重现性,对液相中可溶性抗原、核酸有检测能力。但其影响因素多,且还有好多影响因素目前尚不清楚i抗体的生物素化、磁珠的选择使得非特异结合降低。改进的IECI。与常规IECL相比,敏感性增加了10倍。加强的IECL采用直接夹心免疫法检测,选用一种亲和力常数zui高的抗体进行*免疫反应,敏感性达10个/ml。

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