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抗凝血因子Ⅷ抗体自身抗体
阅读:661 发布时间:2011-8-221.同义词 依据能否抑制FⅧ的功能,将抗FⅧ自身抗体分成两种类型,即抑制型和功能型。抑制型抗体依据其对FⅧ的活性影响不同分为两个亚型。亚型I按照剂量依赖方式*抑制FⅧ的功能,而亚型Ⅱ即使在高浓度情况下也不会*抑制FⅧ的功能。产生这种现象的原因是亚型I对自身抗原有着高亲和性(相对于亚型Ⅱ而言)。而功能类型的抗FⅧ的抗体则不能抑制FⅧ的功能,即使它们是针对FⅧ的特异性抗体。
2.致病作用 无论功能型还是抑制型自身抗体都能通过明显减慢FX转化为FXa的速度来影响凝血系统中的级联反应。其机制是,抗体能与那些直接影响蛋白水解作用的FⅧ分子的结合位点结合,从而影响酶的活性。同时抗体还能改变FⅧ分子的三维立体结构,从而降低其对酶的亲和性。还有一种说法就是,由于抗FⅧ抗体自身不能*抑制FⅧ功能,机体会通过增加吞噬细胞(诸如肝枯否细胞等)对FⅧ免疫球蛋白复合物的摄人来加速对循环中FⅧ的清除。
经研究发现,抗FⅧ的自身抗体优先结合位点主要是FⅧ轻链C2区的羧基末端和重链A2区的氨基末端,其他位点则遍布于FⅧ分子,甚至包括含有一连串酸性氨基酸和FⅧ活性主要位点的轻链A3区。
3.检测方法 定量检测抗FⅧ抗体可以用混合稀释法,即用定量的FⅧ与含有抗体的血浆结合,从而每毫升的抗体单位数则可以用中和FⅧ的血浆稀释液的倒数来计算。大多数实验室通常采用“新牛津法”(FⅧ来源于浓缩血浆)和“巴塞得法”(FⅧ来源于正常血浆,且计算结果用巴塞得单位表示)。
色谱分析法也可以用来检测抗FⅧ抗体,这种方法的原理是,经凝血酶激活的FⅧ可以与FIXa共同作用于五色底物使其产生FXa,因此抗FⅧ抗体的浓度就与经分光光度仪测出的光学浓度成一定的反比例关系,从而定量结果就是计算样品能50%抑制色谱改变的倒数值。
以上方法都是着眼于FⅧ的非功能区检测抗体,针对功能区而设计的方法也可以检测抗体。一种方法是印迹技术,它可以检测出直接与不溶性FⅧ结合的抗体。方法如下:FⅧ经电泳后转移到硝酸纤维素膜上,将抗体与膜结合;或者将抗体直接结合到包被有FⅧ的聚苯乙烯板上。另一种方法是免疫沉淀,它可以检测出与可溶性FⅧ分子或片段结合的抗体,方法如下:测定抗体与含FⅧ分子在凝胶中形成的免疫沉淀环直径,这种方法的优点是避免FⅧ分子的立体结构区变更,从而减少因FⅧ分子的不溶性而产生错误结果的概率。
在使用上述检测方法时,需注意到:由于不同FⅧ分子片段的表面序列相似性而造成抗体与分子的多个表位结合,这样会影响蛋白质印迹的结果。
4.临床意义 对于临床上任何一个伴有凝血时间延长的、难以解释的出血患者,应立即考虑到检测抗FⅧ抗体,因为这是由抗体介导的凝血异常的zui主要原因,而且大约有50%的带有此抗体的患者没有特殊的病理表现。在大约18%的自身免疫病的患者中,抗FⅧ的抗体效价与疾病的活动性成比例关系。
目前对于这类带有抗FⅧ自身抗体的自身免疫病的治疗多采用非特异性免疫抑制疗法,主要有单独使用糖皮质激素、环磷酰胺,或者配合大剂量FⅧ溶液;有时还采用静脉输注免疫球蛋白,但疗效不够理想。