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鸡胱天蛋白酶8（Caspase-8）elisa试剂盒
阅读：2260 发布时间：2011-1-25| 提 供 商 | 上海源叶生物科技有限公司 | 资料大小 | 0K |
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| 资料类型 | 浏览次数 | 2260次 | |
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鸡
胱天蛋白酶
8
（
Caspase-8
）定量检测试剂盒（
ELISA
）
【鸡胱天蛋白酶
8
（
Caspase-8
）
Elisa
试剂盒试剂盒用途】
定量检测鸡血清、血浆、组织及相关液体样本中
胱天蛋白酶
8
（
Caspase-8
）的含量。
【鸡胱天蛋白酶
8
（
Caspase-8
）
Elisa
试剂盒检测原理】
本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（
ELISA
）。将标准品、待测样本加入到预先包被鸡
胱天蛋白酶
8
（
Caspase-8
）单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物
A
、
B
，底物（
TMB
）在辣根过氧化物酶（
HRP
）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中鸡胱天蛋白酶
8
（
Caspase-8
）浓度呈正相关，
450nm
波长下测定
OD
值，根据标准品和样品的
OD
值，计算样本中鸡
胱天蛋白酶
8
（
Caspase-8
）含量。
【鸡胱天蛋白酶8（Caspase-8）Elisa试剂盒试剂盒组成】
|
1 |
酶标包被板
|
12
孔
×4
条
|
7 |
显色剂
A
液
|
3mL
|
|
2 |
标准品
|
0.3mL×6
管
|
8 |
显色剂
B
液
|
3mL
|
|
3 |
20
倍浓缩洗涤液
|
15mL
|
9 |
终止液
|
3mL
|
|
4 |
样本稀释液
|
3mL
|
10 |
说明书
|
1
份
|
|
5 |
特殊稀释液
|
3mL |
11 |
封板膜
|
2
张
|
|
6 |
酶标试剂
|
3mL
|
12 |
密封袋
|
1
个
|
备注：
标准品（
1
号
→
6
号）浓度依次为：
120
、
60
、
30
、
15
、
7.5
、
3.75 pmol
/L
.
【鸡胱天蛋白酶8（Caspase-8）Elisa试剂盒需要而未提供的试剂和器材】
1
、
37
℃
恒温箱
2、
标准规格酶标仪
3、
精密移液器及一次性吸头
4、
蒸馏水
5、
一次性试管
6、
吸水纸
【鸡胱天蛋白酶8（Caspase-8）Elisa试剂盒操作步骤】
1
、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡
30
分钟。
2
、配液：用蒸馏水将
20
倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3
、加标准品和待测样本：取足够数量的
酶标包被板，固定于框架上，
分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品
50μL
；待测样本孔中先加入待测样本
10μL
，再加样本稀释液
40μL
（即样本稀释
5
倍）；空白对照孔不加。
4
、温育：
37
℃水浴锅或恒温箱温育3
0min
。
5
、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置
1min
，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板
4
次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。
6
、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液
50μL
，空白对照孔不加。
7
、温育：
37
℃水浴锅或恒温箱温育3
0min
。
8
、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置
1min
，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板
4
次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。
9
、显色：每孔先加入显色剂
A
液
50μL
，再加入显色剂
B
液
50μL
，平板混匀器混匀
30s
（或用手轻轻震荡混匀
30s
），
37
℃避光显色15min。
10
、终止：
取出酶标板，每孔加终止液
50μL
，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。
11
、测定：
以空白孔调零，在终止后
15
分钟内，用
450nm
波长测量各孔的吸光值（
OD
值）。
12
、计算：
根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
【鸡胱天蛋白酶8（Caspase-8）Elisa试剂盒样本要求】
1
、样本
不能含叠氮钠（NaN
3
）
，因为
叠氮钠（NaN
3
）是
辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2、
标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能立即试验，可
将标本放于
-20
℃保存，但应避免反复冻融。
3
、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。
【鸡胱天蛋白酶8（Caspase-8）Elisa试剂盒注意事项】
1
、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
2
、
酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
3
、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。
4
、牢记样本已经稀释
5
倍，计算结果乘以
5
才是样本实际浓度。
5
、本试剂盒定量范围为
3.75-120pmol/L
，超过此范围，为标准曲线延伸计算所得，不做为准确定量结果，请用特殊稀释液稀释后测定准确结果（
3.75-120pmol/L
范围内），乘以总稀释倍数即为样本zui终浓度。
6
、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。
7
、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；
酶标
工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔
；不得重复使用
封板膜
。
8
、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。
9
、底物
B
对光敏感，避免长时间暴露于光下。
【鸡胱天蛋白酶8（Caspase-8）Elisa试剂盒操作程序总结】
准备试剂，样品和标准品
计算
【鸡胱天蛋白酶8（Caspase-8）Elisa试剂盒检测范围】
3.75pmol/L - 120pmol/L
【鸡胱天蛋白酶8（Caspase-8）Elisa试剂盒规格】
48
人份/盒
【鸡胱天蛋白酶8（Caspase-8）Elisa试剂盒贮藏】
2-8
℃，避光防潮保存。
【鸡胱天蛋白酶8（Caspase-8）Elisa试剂盒有效期】
6 个月