ITC等温滴定量热仪是一种用于测量生物分子相互作用（如酶-底物、抗体-抗原、核酸-配体等）的热力学参数的精密仪器。
以下是ITC等温滴定量热仪实验操作步骤：
1. 加载样品
滴定池（Sample Cell）：
加入受体溶液（如蛋白质或核酸溶液）。
注射器（Syringe）：
吸入配体溶液（如底物或抑制剂），确保无气泡，安装到注射器模块。
2. 开始滴定
基线稳定：
启动仪器，等待基线稳定。
初始滴定：
执行一次大体积滴定，观察信号响应，检查是否漏液或堵塞。
正式滴定：
按设定参数逐滴滴定，记录每次滴定后的热量变化。
观察信号峰值和回归基线情况，避免过载或饱和。
3. 数据采集
实时监控：
观察软件中的原始滴定曲线，确保信号正常（如峰形对称、无异常噪声）。
保存数据：
实验结束后保存原始数据文件，备份至本地或云端。
二、ITC等温滴定量热仪实验后处理：
1. 清洗仪器
冲洗注射器和滴定池：
用超纯水或缓冲液多次冲洗，去除残留样品。
拆卸注射器，用专用工具清洗活塞和密封圈，避免堵塞。
干燥与维护：
擦干仪器表面，定期检查搅拌子、温度传感器和电路连接。
2. 数据分析
拟合模型：
使用分析软件对原始数据进行拟合。
选择合适模型（如单一站点结合模型、多站点模型或异构结合模型）。
参数提取：
结合常数（Ka）：反映配体与受体的结合亲和力。
焓变（ΔH）：结合过程的热量变化（正值为放热，负值为吸热）。
熵变（ΔS）和吉布斯自由能（ΔG）：通过范特霍夫方程计算。
化学计量数（n）：配体与受体的结合比例。
3. 结果验证
重复实验：
重复至少3次独立实验，确保数据一致性。
对照实验：
设置空白对照（如缓冲液滴定缓冲液），排除非特异性信号。
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