伏马毒素免疫亲和柱适合于和HPLC或LC-MS结合使用,定量检测FB1、FB2和FB3。适用于粮谷、饲料等样本中的伏马毒素净化处理,提高了样品的纯度,纯化后的提取液可用不同的分析方法测定 伏马毒素免疫亲和柱适用范围及性能:
用于定量检测谷物、酒类等食品和饲料等样本中的伏马毒素(FB)时的样品前处理。
伏马毒素免疫亲和柱的试验原理:
本产品净化的基础是抗原抗体反应,伏马毒素单克隆抗体连接在柱内凝胶介质上,样品中的伏马毒素经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢通过,在免疫亲和柱内,伏马毒素与抗体结合,洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。后采用甲醇-乙酸洗脱伏马毒素,然后进行相关分析。
伏马毒素免疫亲和柱的检测步骤
l.样品制备
将固体样品按四分法缩分至1kg,全部用谷物粉碎机磨碎并磨细至粒度小于1mm,混匀分成2份作为试样,分别装入洁净的容器内,密封,标识后置于4℃下避光保存。玉米油样品直接取2份作为试样,分别装入洁净的容器内,密封,标识后置于4℃下避光保存。
2.试样提取
准确称取固体样品5g(精确至0.01g)于50mL离心管中,加入20mL乙腈-水溶液(50+50),涡旋或振荡提取20min,取出后,在4000r/min下离心5min,将上清液转移至另一离心管中。玉米油样品操作同固体样品,提取液在下层。
3.试样净化
取2mL提取液,加入47mL吐温-20/PBS溶液,混合均匀后过免疫亲和柱,流速控制在1~3mL/min,用10mLPBS缓冲液淋洗免疫亲和柱,分别用1mL甲醇-乙酸溶液(98+2)洗脱免疫亲和柱三次,收集洗脱液,55℃下氮吹至干,加入1mL乙腈-水溶液(20+80)溶解残渣。涡旋30s,过0.45um微孔滤膜后,收集于进样瓶中,待测。
以上便是今天关于伏马毒素免疫亲和柱的试验原理及检测步骤的全部分享了,希望对大家今后使用本设备能有帮助。
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