1）电解质 抗原抗体结合后由亲水胶体变为疏水胶体，此时易受电解质影响。通常在抗原抗体反应中，以8.5g/L NaCl溶液作为抗原抗体的稀释液及反应液，其中Na+和Cl-可分别中和胶体颗粒上的电荷，使胶体颗粒的电势下降，形成可见的沉淀物或凝集物。若无电解质存在，则不出现可见反应。但如果电解质浓度过高，则会出现非特异性蛋白质沉淀，即盐析。

　　2）酸碱度 pH过高或过低都可影响抗原和抗体的理化性质。例如，当pH为3左右时，可出现非特异性酸凝集。此时因接近细菌抗原的等电点，细菌表面蛋白或其他基团所带的电荷消失，其间互相的排斥力丧失而导致凝集，影响试验的可靠性。抗原抗体反应一般以pH6～pH9为宜。

　　3）温度 抗原抗体反应zui适温度为37℃。一般在15℃～40℃范围内进行，在此范围内，温度越高，分子运动速度加快，增加抗原抗体接触机会，反应速度越快，但亦容易引起复合物解离;温度越低，反应速度缓慢，但抗原抗体结合牢固，易于观察。某些特殊的抗原抗体反应需要特定的温度，如冷凝集素在4℃时与红细胞结合，20℃以上反而解离。