精品视频一区二区三区 显微镜的照明方法汇总

                               显微镜的照明方法汇总

显微镜的照明方法按其照明光束的形成，可分为"透射式照明"和"落射式照明"两大类。前者适用于透明或半透明的被检物体，绝大数生物显微镜属于此类照明法；后者则适用于非透明的被检物体，光源来自上方，又称"反射式照明"。主要应用于金相显微镜或荧光镜检法。
1． 透射式照明
　　生物显微镜多用来观察透明标本，需要以透射光来照明。有两种照明方式：
（1） 临界照明  光源经过聚光镜后，成像于物平面上。若忽略光能的损失，则光源像的亮度与光源本身相同，因此，这种方法相当于在物平面上放置光源。显然，在临界照明中，如果光源表面亮度不均匀，或明显地表现出细小的结构，如灯丝等，那么就要严重影响显微镜观察效果，这是临界照明的缺点。其补救的方法是在光源的前方放置乳白和吸热滤色片，使照明变得较为均匀和避免光源的长时间的照射而损伤被检物体。用透射光照明时，物镜成像光束的孔径角，被聚光镜像方光束的孔径角所决定，为使物镜的数值孔径得到充分利用，聚光镜应有与物镜相同或稍大的数值径。
（2） 柯拉照明  临界照明中物面光照度不均匀的缺点，在柯拉照明中可以消除。在光源与聚光镜之间加一辅助聚光镜。可见，由于不是直接把光源，而是把被光源均匀照明了的辅助聚光镜（也称为柯拉镜）成像在标本上，所以物镜的视场（标本）得到均匀的照明。
2． 落射式照明
在观察不透明物体时，例如通过金相显微镜观察金属磨片，往往是采用从侧面或者从上面加以照明的方式。此时，被观察物体的表面上没有盖玻璃片，标本像的产生是靠进入物镜的反射或散射光线。
3． 用暗视场来观察微粒的照明方法
用暗视场方法可以观察超显微质点。所谓超显微质点，是指那些小于显微镜分辨极限的微小质点。暗视场照明的原理是：不使主要的照明光线进入物镜，能够进入物镜成像的只是由微粒所散射的光线。因此，在暗的背景上给出了亮的微粒的像，视场背景虽暗，但衬度（对比）很好，可以使分辨率提高。
暗视场照明又有单向和双向之分：
（1） 单向暗视场照明  由照明器发出的光线，经不透明的标本片反射后，主要的光线都没有进入物镜，进入物镜的光线主要是由微粒或凸凹不平的细部所散射的光线。显然，这种单向的暗视场照明，对观察微粒的存在和运动是有效的，但对物体细节的再现不是有效的，即存在"失真"的现象。
（2） 双向暗视场照明  双向暗视场照明，可以消除单向所产生的失真缺点。在普通的三透镜聚光镜前面，安置一个环形光阑，即可实现双向暗视场照明。在聚光镜的zui后一片与载物玻璃片之间浸以液体，而盖玻璃片与物镜之间是干的。于是，经过聚光镜的环形光束，在盖玻璃片内全反射而不能进入物镜，形成如图中的回路。进入物镜的只是由 标本上的微粒所散射的光线，形成了双向暗视场照明。