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兔色素上皮衍生因子(PEDF)elisa试剂盒操作步骤

阅读:791      发布时间:2023-3-15
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兔色素上皮衍生因子(PEDF)elisa试剂盒操作步骤:


1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

 虫草素 英文名称:CordycepsCAS号:73-03-0分子式:251.24

 补骨脂酚英文名称:BakuchiolCAS号:10309-37-2分子式:256.38

 补骨脂二氢黄酮甲醚英文名称:Buguzhi two hydrogen flavone etherCAS号:分子式:338.397

 补骨脂二氢黄酮英文名称:Psoralen two flavanonesCAS号:分子式:

 补骨脂定英文名称:PsoralidinCAS号:18642-23-4分子式:

 龙脑英文名称:BorneolCAS号:507-70-0分子式:154.25

 表没食子儿茶素英文名称:EpigallocatechinCAS号:970-74-1分子式:306.27

表白桦脂酸英文名称:Betulinic acid.CAS号:38736-77-5分子式:

 百秋里醇英文名称:Patchouli alcoholCAS号:分子式:

 1,8-桉叶素英文名称:1,8- EucalyptusCAS号:470-82-6分子式:154.25

 雷公藤内酯甲英文名称:, aCAS号:84104-71-2分子式:454.68

 13-乙酰基-9-羟基巴卡丁III英文名称:13- acetyl -9- hydroxy Chiba kart IIICAS号:142203-65-4分子式:630.67938

 亚麻木酚素英文名称:Flax phenolCAS号:148244-82-0分子式:686.71

 延胡索乙素英文名称:TetrahydropalmatineCAS号:2934-97-6分子式:355.4275


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