前期准备

        利用ELISA试剂盒进行临床检验常见的样本一般包括血液（指

血，静脉血），尿，粪便，脑脊液，胸腹水，前列腺液，精液

，阴道分泌物等，这些样本收集的时间、方法和保存都有一定

的要求。

样本实验准备
在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成

份是否足够稳定。对收集后当天就进行
检测的样本，ELISA试剂盒及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及

时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，-70℃冻存备用。

标本应避免反复冻融。
    液体类标本:  包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、

细胞培养上清等。
1. 血清：
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000

转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离

心。
2. 血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混

合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收

集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
3. 尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收

集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑

脊液参照此实行。
4. 细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000

-3000转/分）。仔细收集上清。
5. 培养细胞
    检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液

，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白

萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右

（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形

成，应再次离心。
6. 组织标本
    切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液

氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入

一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆

器将标本匀浆化。ELISA试剂盒离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细

收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。