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上海申知心生物科技有限公司
主营产品： 高血脂症动物模型,心血管疾病动物模型,缺血性心脏病动物模型 |
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2024-3-5 阅读(2069)
1. 准备0-1天内的SD大鼠新生鼠。
2. 用温的无菌去离子水，轻轻擦拭每只新生鼠。
3. 用70%的乙醇去除新生鼠身体上的污染物。
4. 断头，取心脏，心脏置于冰的PBSG溶液中。
5. 除去血液和非心脏组织。
6. 剪碎心脏组织。
7. 加入胰酶-胶原酶消化液，每只新生鼠75ul。
8. 在37°C的摇床培养箱中，以250 rpm/ 5 min，消化心肌组织。
9. 轻轻涡旋，然后离心10秒，丢弃第一次消化的上清液。
10. 开始第二次消化，250 rpm/ 5 min后，轻轻涡旋，然后离心10秒，收集含心肌细胞的上清液到2倍体积的马血清中。
11. 重复上述心肌细胞的消化过程，共进行10次消化，收集心肌细胞悬液。
12. 使用没有包被的10cm大皿，预种植心肌细胞1h。
13. 在1h后，收集没有贴壁的心肌细胞，200g/10min 离心，
14. 重悬心肌细胞于DMEM培养基中，种植在包被过的培养皿中。
