大家在异构体方法开发时，是不是经常会碰这种情况：缓梯度和等度的分离效果优于梯度，但有机相比例稍高时，异构体间不能；降低有机相比例到一定程度后，分离度就无法再有提高，甚至异构体间看着已，但因为峰过宽导致积分后分离度不符合要求。无法通过调整有机相的比例来达到峰形与分离度的兼顾，这种情况下，我们真的没办法了吗？

今天通过两个案例来给大家介绍一个小妙招来解决这个问题。

结论：两成分的分离度1.9。

可见，这种情况下，我们通过在梯度前加一段低比例有机相段（此例中为前20分钟的这一段），使两个手性异构体在色谱柱内以较缓慢的速度移动以加大分离。再用5分钟梯度回到80%甲醇来加快洗脱以修正峰形。这种方式，可以起到一个比较好的增加分离的效果。