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人DNA修复基因XRCC1ELISA检测试剂盒操作步骤
阅读:304 发布时间:2021-9-28
人DNA修复基因XRCC1ELISA检测试剂盒 操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1
小鼠黑色素瘤细胞;B16-F1
小鼠T淋巴瘤细胞(鸡OVA基因修饰);E.G7-OVA
小鼠骨髓瘤细胞;P3/NSI/1-Ag4-1
小鼠B细胞杂交瘤细胞;W6/32
杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7B5
杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7E7
小鼠树突状细胞肉瘤低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);DG6-GFP
小鼠树突状细胞肉瘤低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);DG6-VAP33-GFP
小鼠胚胎成纤维细胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)
小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]
小鼠肺腺癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);LA1-GFP
小鼠肺腺癌低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);LA1-VAP33-GFP
小鼠前胃癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);MFC-B5-GFP
C57BL/6小鼠T细胞淋巴瘤细胞;RMA
小鼠腹水瘤细胞;S-180
杂交瘤(B类);IB3C10H12A12G2H8F3
杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2F8
杂交瘤(B类);Z1510C6D10F4G6
杂交瘤(B类);Z153A2A5B3A12
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A2
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A4
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A5
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B2
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B4
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B5
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B6
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C2
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C4
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D2
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D3
tTA基因修饰的小鼠睾丸畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-1A3
tTA基因修饰的小鼠睾丸畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-3A1
tTA基因修饰的小鼠睾丸畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-3E5
tTA基因修饰的小鼠睾丸畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-4D6
tTA基因修饰的小鼠睾丸畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1D3
tTA基因修饰的小鼠睾丸畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1F3
tTA基因修饰的小鼠睾丸畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-3C3
tTA基因修饰的小鼠睾丸畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-3C8