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组织相容性2-K1-K 区进口试剂盒​操作步骤

阅读:252          发布时间:2021-10-12

组织相容性2-K1-K 区进口试剂盒 操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

凋亡相关因子配体(FASL)重组蛋白

凋亡诱导因子(AIF)重组蛋白

毒蕈碱型胆碱受体M1(CHRM1)重组蛋白

毒蕈碱型胆碱受体M2(CHRM2)重组蛋白

端粒酶关联蛋白1(TEP1)重组蛋白

多巴胺受体D1(DRD1)重组蛋白

多巴胺受体D2(DRD2)重组蛋白

多巴胺受体D3(DRD3)重组蛋白

多巴色素异构酶(DT)重组蛋白

多功能肽酶2(LMP2)重组蛋白

多聚免疫球蛋白受体(PIGR)重组蛋白

多效生长因子(PTN)重组蛋白

多药耐药关联蛋白1(MRP1)重组蛋白

二胺氧化酶(DAO)重组蛋白

二氢二醇脱氢酶2(DDH2)重组蛋白

二氢硫辛酸脱氢酶(DLD)重组蛋白

二氢硫辛酸转乙酰基酶(DLAT)重组蛋白

发动蛋白2(DNM2)重组蛋白

泛素(Ub)重组蛋白

泛素激活酶样蛋白(UBE1L)重组蛋白

泛素交叉反应蛋白(UCRP)重组蛋白

泛素结合酶E2A(UBE2A)重组蛋白

泛素连接酶E3A(UBE3A)重组蛋白

防御素β103B(DEFβ103B)重组蛋白


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