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Thermo 89882 Zeba™ 脱盐离心柱用户指南

时间:2025-4-29阅读:350

Thermo 89882 Zeba™ 脱盐离心柱用户指南

一、产品概述

Thermo 89882 Zeba™ 脱盐离心柱是赛默飞世尔科技(Thermo Fisher Scientific)旗下Zeba™系列的核心产品,专为蛋白及生物样品快速脱盐设计。该离心柱采用7K MWCO(分子量截留值)高性能体积排阻色谱树脂,通过离心操作实现高效脱盐,同时保留大分子蛋白,适用于手动或自动液相色谱(LC)前处理流程。

二、技术规格

  • 截留分子量(MWCO):7,000 Da

  • 适用体积范围:0.5 mL(单柱容量,支持30–130 µL样品体积)

  • 树脂类型:专有高性能体积排阻色谱树脂

  • 包装规格:25柱/盒(货号89882)

  • 储存条件:4°C保存,常温运输

  • 回收率:对>7,000 Da蛋白回收率≥95%,去除≥95%盐及小分子污染物(<1,000 Da)

三、核心功能

  1. 高效脱盐

    • 通过体积排阻色谱原理,小分子盐类(如NaCl、Tris等)随缓冲液流出,大分子蛋白被树脂截留。

    • 兼容高盐浓度(如1 M NaCl)样品,无需稀释。

  2. 高回收率

    • 专有树脂设计降低蛋白非特异性结合,即使低浓度蛋白(25 µg/mL)仍可保持高回收率。

  3. 快速操作

    • 单次离心(1,000 × g,2分钟)即可完成脱盐,无需色谱系统或树脂平衡步骤。

    • 一张96孔Zeba脱盐板可在5分钟内处理96份样品。

  4. 兼容性

    • 与主流自动液相色谱系统(如AKTA)兼容,支持手动注射器或自动化工作站操作。

四、操作流程

(一)离心柱预处理
  1. 去除储存液

    • 掰断柱子尾部并松开盖子,置于15 mL离心收集管中。

    • 1,000 × g离心2分钟,弃去收集管中液体。

  2. 树脂平衡

    • 向柱子中加入1 mL缓冲液(如PBS),1,000 × g离心2分钟,弃去液体。

    • 重复此步骤2–3次,确保树脂充分平衡。

(二)样品上样
  1. 样品加载

    • 将柱子置于新收集管中,缓慢加入30–130 µL样品至树脂中心。

    • 可选压层:对于<70 µL样品,样品吸收后加入15 µL超纯水或缓冲液。

  2. 离心脱盐

    • 1,000 × g离心2分钟,收集管中液体即为脱盐样品。

(三)后续分析
  • 脱盐样品可直接用于SDS-PAGE、质谱分析、酶活性测定或液相色谱纯化。

五、常见问题与解决方案


问题可能原因解决方案
样品或缓冲液无法流穿离心机故障或柱子堵塞检查离心机状态,避免接触柱子边缘
产量低未使用压层对<70 µL样品添加压层
蛋白回收率低蛋白不稳定使用合适缓冲液平衡柱子


六、应用场景

  1. 蛋白质组学:去除样品中高浓度盐类,优化质谱分析结果。

  2. 药物研发:快速脱盐后进行药物-蛋白结合研究。

  3. 生物制药:缓冲液置换以适应下游纯化工艺。

  4. 高通量筛选:结合96孔板实现自动化脱盐。

七、注意事项

  1. 储存条件:收到后立即4°C保存,避免树脂干燥。

  2. 样品兼容性:适用于>7,000 Da蛋白,小分子蛋白(如肽段)可能被截留。

  3. 安全操作:树脂悬液含0.05%,避免接触皮肤或吸入。



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