高选择性荧光染料结合:试剂盒采用了具有高度选择性的荧光染料 。这种染料仅在与 RNA 结合时才会发出强烈的荧光信号,而与 DNA、蛋白质或游离核苷酸等几乎不发生作用。当荧光染料与 RNA 结合后,其荧光性质会发生显著变化,荧光强度大幅增强,即使样本中 RNA 丰度极低,也能产生可被精确检测的信号,确保了对 RNA 定量的准确性和特异性。
基于标准曲线的精准定量:使用试剂盒时,先利用提供的缓冲液对浓缩分析试剂进行稀释,随后加入样本(可接受 1µL 到 20µL 间的任意体积) 。Qubit 荧光计会读取样本的荧光信号强度,并将其与试剂盒内预稀释 RNA 标准品建立的标准曲线进行比对。通过这种方式,能够精准计算出样本中 RNA 的浓度,整个过程通常仅需约 2 分钟,大大提高了实验效率。
良好的污染物耐受性:在实际实验过程中,RNA 样本常受到各种污染物的干扰,如盐、溶剂、洗涤剂、游离核苷酸或蛋白质等 。Qubit RNA HS Assay Kit 对这些常见污染物具有出色的耐受性,这些污染物的存在基本不会对 RNA 定量结果造成明显影响,保证了在复杂样本背景下也能获得可靠的 RNA 浓度数据。
高灵敏度与准确性:该试剂盒能够精准检测低至 250 pg/µL 的 RNA 浓度 ,在低丰度 RNA 样本定量方面表现。与传统的紫外吸收法相比,其检测灵敏度更高,能有效降低背景噪音,避免因背景干扰导致的定量误差,为科研人员提供更准确的 RNA 浓度信息。例如在研究微量细胞中的 RNA 表达时,该试剂盒能够精准定量低含量的 RNA,助力科研人员深入探索细胞内的基因表达调控机制。
特异性强:试剂盒中的荧光染料对 RNA 具有高度特异性,能够有效区分 RNA 与 DNA、蛋白质及游离核苷酸 。在进行 RNA 定量时,不会因其他生物分子的存在而产生误判,保证了实验结果的可靠性。这对于需要准确 RNA 定量的下游应用,如制备高质量的 cDNA 文库用于基因表达分析、进行 RT-qPCR 检测基因表达水平的变化等,具有重要意义。
操作简便快捷:使用 Qubit RNA HS Assay Kit 进行 RNA 定量的操作流程非常简单 。科研人员只需按照试剂盒说明书,依次完成试剂稀释、样本添加和荧光计读数等步骤,即可快速获得 RNA 浓度结果。无需复杂的样品前处理或昂贵的专业设备,即使是实验新手也能轻松上手,极大地提高了实验效率,节省了时间和人力成本。
基础分子生物学研究:在基础分子生物学研究中,常需要对细胞或组织中的 RNA 进行定量 。Qubit RNA HS Assay Kit 可用于准确测定 mRNA、miRNA 等各类 RNA 的含量,为研究基因转录、RNA 加工、RNA 稳定性等生物学过程提供关键数据支持。例如在研究细胞分化过程中基因表达的动态变化时,通过该试剂盒对不同分化阶段细胞的 RNA 进行定量,有助于揭示细胞分化的分子机制。
疾病诊断与研究:在疾病诊断和研究领域,RNA 定量对于疾病的早期诊断、病情监测以及药物研发等具有重要价值 。例如在肿瘤研究中,通过检测肿瘤组织或血液中特定 RNA 标志物的含量,可辅助肿瘤的早期诊断和预后评估;在病毒感染研究中,准确测定病毒 RNA 的拷贝数,有助于了解病毒的感染程度和复制情况,为抗病物的研发提供依据。Qubit RNA HS Assay Kit 能够为这些研究提供可靠的 RNA 定量结果,推动疾病诊断与治疗技术的发展。
生物技术与制药:在生物技术和制药行业,RNA 定量是许多工艺过程中的关键环节 。如在 RNA 疫苗的研发和生产过程中,需要对 RNA 的质量和浓度进行严格把控,以确保疫苗的有效性和安全性。Qubit RNA HS Assay Kit 的高灵敏度和准确性,能够满足 RNA 疫苗研发中对 RNA 定量的严格要求,助力新型疫苗的开发和生产。
样本要求:试剂盒适用于多种来源的 RNA 样本,包括细胞裂解物、组织匀浆、血清、血浆等 。但为确保实验结果的准确性,样本应尽可能保持完整,避免 RNA 降解。在样本采集和处理过程中,需严格遵循相关操作规程,使用无 RNase 的耗材和试剂。若样本中存在可能影响 RNA 定量的杂质,如过多的蛋白质、多糖等,建议在使用试剂盒前进行适当的纯化处理。
实验操作流程:首先,根据实验需求,使用试剂盒提供的稀释缓冲液将浓缩分析试剂稀释成工作液 。接着,取适量(1µL 到 20µL)的 RNA 样本加入到稀释好的工作液中,充分混合均匀。将混合后的样品放入 Qubit 荧光计中,按照仪器操作指南启动检测程序,荧光计会自动读取荧光信号并计算出 RNA 浓度。整个操作过程需在室温下进行,且要注意避免样品受到光照、污染等因素的影响。
存储条件:为保证试剂盒的性能稳定,Qubit RNA HS Assay Kit 应存储于 2 - 8°C 的环境中 。在使用过程中,要尽量减少试剂盒的反复冻融次数,取用试剂后应及时放回冰箱保存。同时,要注意试剂盒的有效期,在有效期内使用,以确保实验结果的可靠性。
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