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上海单细胞分离巧妙的新方法在不断涌现

阅读:623        发布时间:2019-6-25
上海单细胞分离巧妙的新方法在不断涌现
上海单细胞分离 是单细胞研究中困难的步骤之一,目前的单细胞分离策略主要分为三类:手动分离、荧光激活的细胞分选和微流体技术。
   在进行单细胞转录分析之前,我们需要确定自己拿到了正确的细胞。如果你想要的细胞已经处于悬浮状态(比如循环肿瘤细胞),而且含量相对比较丰富,那么流式细胞分析将是你的理想选择。如果样本是实体组织,我们可以用酶分解掉胶原和其他细胞外蛋白。不过酶学消化对细胞影响较大,甚至可能改变基因转录情况。把组织细胞制成悬液之后,我们就可以通过特异性的荧光标签分离出自己想要的细胞。进一步拿到单细胞是比较棘手的一步,可能需要用到微流体设备。
   将细胞分散到悬液中,会失去它们在组织里的位置信息。如果你想要了解单细胞所处的环境,就得使用激光捕获显微切割技术,上海单细胞分离通过扫描组织切片定位目的细胞,并将其提取出来。操作者需要非常小心,以免切到细胞或细胞核。数量为的细胞只能用毛细管等器具手动获取。离法的难度与细胞或个体的大小成反比,较大的微生物如藻类、原生动物较容易,个体较小的细菌则较难。
   在显微镜下使用单孢子分离器进行机械操作,挑取单孢子或单细胞进行培养。也可以采用特制的毛细管在载玻片的琼脂涂层上选取单孢子并切割下来,然后移到合适的培养基进行培养。上海单细胞分离对操作技术有比较高的要求,多限于高度专业化的科学研究中采用。当然,除了成熟的方法,巧妙的新方法也在不断涌现,能以更高的准确性和特异性来分离单细胞。

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