| 注册| 产品展厅| 收藏该商铺

行业产品

当前位置:
Bio-Techne>>技术文章>>单细胞测序的主要步骤和特点介绍

单细胞测序的主要步骤和特点介绍

阅读:2571        发布时间:2021-6-22
单细胞测序的兴起,不仅是新概念炒作,而是在相关领域,长时间由于技术的瓶颈很多生物学问题没有解决,现在突然有一个技术可以高性价比地解决这些问题,导致这个技术被大量应用。
  以单细胞转录组测序技术为例开展探讨,单细胞转录组主要包括以下四个步骤,其中关键的一点就是如何进行单细胞的捕获/分选,这是决定单细胞检测成本和通量的关键步骤。
  主要步骤:

在细胞分选的方法里,主要包括特异性分选和非特意性分选两类方法,两类方法的关系有点类似定量(只针对特定目标基因进行检测)和转录组测序。

        非特异性选择的方法则通常都是高通量的方法,一般是用特定的技术随机从样本中捕获的大量细胞单体,然后直接平行对大量细胞进行独立的测序,再从大量单细胞数据中寻找自己感兴趣的细胞类型进行后续分析。反转录扩增过程中,每个细胞的cDNA会被接上特异的接头序列,保证后续混合测序后还能重新独立拆分每个细胞的数据,芯片由于可以平行进行96个细胞的建库测序,降低了成本。但是这种方式进行单细胞制备时,每个细胞的裂解和核酸扩增反应都不能很*、*,因此每个细胞最终获得的基因数量很有限,一般在1000-2000个左右。而且无法进行细胞筛选,导致大量无用细胞的数据被记录,大大增加了背景噪音信号。如果要增加每个细胞能获得的基因数量,必须选择另一种通量较低的方式进行。

       特异性选择方法,就是用特定标志对特定目标细胞进行挑选,然后对目标细胞开展测序。这种方式虽然通量较低,但是由于每个细胞都是在单独的PCR管中进行裂解和核酸扩增,每一步的反应都可以进行得很*,因此每个细胞最终能获得的基因数等达到10000个左右。另外,由于特异性选择获得的单个细胞都是经过筛选的目的细胞,因此数据质量远高于非特异性选择的高通量方式。

单细胞测序要获得最终高质量数据,我们需要一个好的单细胞分离工具。Namocell单细胞分离仪可以帮助用户进行快速、高效、轻柔地单细胞分离捕获。分离后的单个细胞是经过筛选的用户感兴趣的目的细胞,并且都具备很好的细胞活性,非常适合进行单细胞测序。


收藏该商铺

登录 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我们将在第一时间回复您~
二维码 意见反馈
在线留言