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单细胞转录组的基本概念,一起来了解下

阅读:1641        发布时间:2022-6-23
单细胞转录组就是某一时刻单个细胞内所有mRNA总表达量,其表达量反映该细胞的总体特征。单细胞转录组技术的出现使得我们可以把研究的精度从组织多细胞层面精确到单个细胞领域,可以单独研究某个细胞或者某群细胞具体的特征,特别是对于细胞发育、肿瘤微环境、单细胞图谱绘制方面发挥了关键作用。
  普通转录组的思路也可以应用到单细胞转录组。普通转录组相当于把一群细胞或一个器官混合到一起去提取RNA,获得的是每个细胞中RNA表达量的平均值。单细胞是把每个细胞单独分出来去提取RNA,然后建库测序,获得是是单个细胞的表达值。在每个细胞里面基因的表达具有随机性,且存在异质性。而且这些细胞群中会存在不同类型的细胞,尤其是当我们对整个组织或者器官进行测序时,它们本身就是由不同类型的细胞组成的,而我们用普通转录组来测序,相当于掩盖住了这些不同的细胞类型的差异,展示的是整个组织的平均的状态,所以说单细胞从这个来看跟普通转录组就不同在是用一个细胞测,不是用一堆细胞测。
单细胞转录组,第一步就是把单个细胞分选出来。分选的方式也比较多,物理切割,酶消化,FACS分选等。假如已经分到了一个单细胞,跟常规的转录组步骤上是一样的。下一步就是把单细胞里的RNA提取出来去建库测序。但是一个细胞里的RNA含量是比较少的,难建库成功。

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