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单细胞分选进行预处理的常见方法介绍
阅读：198 发布时间：2023-9-28
如何使单细胞分选的结果更准确、更可靠？我们需要对样品进行预处理。为什么需要对样品进行预处理？常用的预处理方法又有哪些呢？
首先，我们需要了解为什么需要对样品进行预处理。在生物样本中，包括血液、组织、尿液等，通常存在着大量的细胞外基质（ECM）和非细胞成分。这些成分会对单细胞分选产生干扰，导致错误的分选结果。例如，红细胞会与ECM发生粘附，使得它们难以被分离出来；而非细胞成分如蛋白质、糖类等也会与细胞发生相互作用，影响它们的形态和功能。因此，为了消除这些干扰因素，我们需要对样品进行预处理。
接下来，我们将介绍一些常用的预处理方法。
1、细胞裂解：细胞裂解是一种常见的预处理方法，它可以破坏细胞之间的连接，使细胞分散开来。常用的细胞裂解方法有机械裂解、化学裂解和酶裂解。机械裂解是通过物理力量如剪切力来破坏细胞之间的连接；化学裂解则是通过加入特定的化学试剂来破坏细胞之间的连接；酶裂解则是通过使用特定的酶来分解细胞之间的连接。
2、离心：离心是将样品通过高速旋转来分离不同密度的成分的方法。在单细胞分选中，离心可以用来去除ECM和非细胞成分。通常，我们可以先用低速离心将大部分的ECM和其他非细胞成分分离出来，然后再用高速离心进一步去除。
3、免疫磁珠分选：免疫磁珠分选是一种基于抗原-抗体相互作用的分选方法。首先，我们使用特异性抗体标记目标细胞的表面抗原，然后将这些标记的细胞与未标记的ECM或其他非细胞成分混合在一起。接着，我们使用磁性珠子将标记的细胞与非标记的ECM或其他非细胞成分分离开来。这种方法具有高度的选择性和敏感性，可以有效地从复杂的生物样本中分离出目标细胞。
4、流式细胞术：流式细胞术是一种基于激光和电子技术的分选方法。它可以通过检测目标细胞表面的特定分子或荧光蛋白来识别和分离目标细胞。流式细胞术具有高分辨率和灵敏度，可以同时分析大量细胞，因此在单细胞分选中得到了广泛应用。
在单细胞分选过程中，样品的预处理是非常重要的。通过选择合适的预处理方法，我们可以有效地消除干扰因素，提高单细胞分选的准确性和可靠性。