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荧光PCR试剂盒的检测方法常见的局限性主要包括哪几部分
阅读：1350 发布时间：2022/10/26
DNA提取：对上述处理好的标本加入等体积核酸提取液（固体标本加入50μL核酸提取液），100℃恒温处理10min，13,000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存。
检测方法的局限性：
a.样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
b.样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
c.阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
d.病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
e.不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
f.试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；
g.本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
结果判断：
阳性：检测通道Ct值≤35.0，且曲线有明显的指数增长曲线。
可疑：检测通道Ct值>35.0，且出现典型扩增曲线的样本建议重复试验，重复试验结果出现Ct值≤35.0和典型扩增曲线者为阳性，否则为阴性。
阴性：样本检测结果无Ct值且无明显的扩增曲线。
质控标准：
阴性质控品：无明显扩增曲线或无Ct值显示；
阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且Ct值≤32；以上条件应同时满足，否则实验视为无效。