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78次以下是植物游离氨基酸(FAA)ELISA试剂盒的实验使用说明书摘要:
BS-5067 植物游离氨基酸(FAA)ELISA试剂盒
一、实验原理
采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),通过抗体-抗原-酶标抗体复合物与显色底物反应,颜色深浅与样本中FAA浓度成正比。
二、试剂盒组成
预包被酶标板(48T/96T)
标准品(1-2管)及稀释液(5-10mL)
酶标检测抗体(60-120μL)及稀释液
显色液A/B、终止液
浓缩洗涤液(20-30倍)
三、样本处理
血清/血浆:3000转离心10分钟取上清,避免溶血;
细胞上清:3000转离心10分钟去除颗粒物;
组织匀浆:用生理盐水匀浆后离心取上清;
建议分装保存于-20℃,避免反复冻融。
四、操作步骤
标准品稀释:按浓度梯度稀释(如40μmol/L→2.5μmol/L);
加样:
标准孔:50μL标准品
样本孔:40μL稀释液+10μL样本(5倍稀释);
孵育:37℃温育30分钟;
洗涤:用稀释后的洗涤液洗板5次,每次静置30秒;
显色:加显色液A/B各50μL,37℃避光显色15分钟;
终止:加50μL终止液,立即450nm测OD值。
五、注意事项
试剂使用前需平衡至室温;
避免NaN3污染(抑制HRP活性);
显色液需避光保存,终止液有腐蚀性;
不同批次试剂组分不可混用。
六、结果计算
以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制曲线,通过回归方程计算样本浓度。
以上资料仅供参考,如需完整说明书,建议联系供应商获取最新版本。
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