5.血清解冻以后出现了悬浮物是什么?还能继续用吗?
解冻以后如果发现有少量乳白色的絮状或者点状物质,这种主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量,可用400×g离心5 min取上清。不会对细胞有太大的影响。
6.血清在使用前是否需要对血清进行过滤?
一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。
7.使用血清培养细胞以后,镜下观察到会动的“小黑点"会是污染吗?
如果您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,黑点是否做不规则游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。
如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:
(1)细胞生长过程中自然破碎后的细胞残骸;
(2)血清中的杂蛋白,可能是反复冻融的结果;
(3)配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;
(4)培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。
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