精品网站在线免费观看 胰蛋白酶溶液(0.1%)简介

胰蛋白酶溶液(0.1%)

产品货号：T10398

产品规格：100ml

产品简介：

胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后，小肠内的肠肽酶会活化该酶原，形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶，能够继续活化更多胰蛋白酶原，这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作，它会将蛋白质水解为肽，进而分解为氨基酸，其最适温度约为37℃。

尚宝生物 Trypsin solution(0.1%)含0.1%胰酶、无EDTA、无酚红，经过滤除菌，可以直接用于培养细胞的消化或者一些组织的消化。通常室温下1min左右就可以消化下大多数贴壁细胞。抗原修复有多种方法，主要方法可简要归纳为加热修复和非加热抗原修复两大类。非加热抗原修复方法包括酶消化、真空负压、酸水解等方法。目前主要是酶消化法，酶消化是以化学的方法来打断醛键进行修复抗原。

产品组成：

自备材料：

1. PBS、Hanks液或无血清培养液

2. 显微镜

3. 离心机

操作步骤(仅供参考):

1. 抗原修复

①切片脱蜡至水。

②切片入H2O2甲醇溶液处理切片10min。

③自来水洗，蒸馏水洗。

④PBS洗3次，每次1min。

⑤将玻片浸入Trypsin solution(0.1%)，37℃孵育10~30min。

⑥PBS洗3次，每次3min。

⑦按选好的免疫组化染色方法进行染色。

2. 贴壁细胞的消化

①吸除培养液，用无菌PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。

②加入少量Trypsin solution，略盖过细胞即可，室温放置1～2min，不同的细胞消化时间有所不同。

③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。

④如果发现消化不足，则加入Trypsin solution重新消化。

⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g离心1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。

3. 组织的消化

不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。

注意事项:

1. 尽量减少反复冻融的次数，以免失效。

2. 在Trypsin solution过程中，要特别注意避免消化液被细菌污染。

3. Trypsin solution消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月有效。