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神经科学研究新工具：干粉培养基在Neuro-2a细胞分化中的应用实测
时间：2025-5-21
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Neurobasal-A神经元干粉培养基一种专为神经细胞培养设计的基础培养基，适用于新生和成年脑神经元的长期维持和成熟，广泛应用于神经科学研究领域。Neurobasal-A神经元干粉培养基适用于大多数神经元细胞应用，特别是新生和成体脑神经元的长期维持和成熟。它可以在不添加胶质细胞饲养层的情况下，长期和短期地维持神经细胞的同源群落的存活。
Neurobasal-A神经元干粉培养基成分说明
Neurobasal-A神经元干粉培养基配置方法
| 形态 | 粉末 |
| L-谷氨酰胺 | 无 |
| D-葡萄糖 | 4500 mg/L |
| 丙酮酸钠 | 25 mg/L |
| HEPES缓冲剂 | 2600 mg/L |
| 酚红指示剂 | 8.1mg/L |
| 储存条件 | 2-8℃ 密闭、避光 |
| 运输条件 | 常温 |
| 有效期 | 36个月 |
1. 配制用水应使用纯化水、超纯水或注射用水，配制过程中水温应控制在20-30℃。
2. 于配制容器中加入90%配制体积的配制用水（如需配制1 L则这里加900 mL配制用水），开启培养基配制容器的混合系统（建议混合系统单位体积输入功率大于10 W/m3），充分搅拌，搅拌时应避免气泡的产生。
3. 根据所需配制体积，计算所需粉末质量，按照12.92 g/L比例称取粉末培养基（如需配制1 L则需称取12.92 g粉末）。将准确称的培养基干粉加入到步骤【2】的配制容器中，充分搅拌20 min以上，直至粉末完-全溶解；
4. 待溶液完-全澄清后，根据配制体积，按照2.2 g/L比例称取碳酸氢钠（分析纯）粉末，缓慢加入到步骤【3】的溶液中，继续搅拌5-10 min至溶解；
5. 加配制用水将完-全溶解的步骤【4】溶液精确定容至100%配制体积（如需配制1 L则定容至1 L）。
6. 测量pH值，必要时用1 mol/L氢氧-化钠溶液或1 mol/L盐酸溶液调整pH值至7.20-7.30；由于过滤会使培养基pH值稍微偏高，因此此处比目的pH值（7.20-7.40）要低一些。
7. 用孔径为0.2 μm的滤膜正压过滤除菌（注意无菌操作）。
8. 过滤结束可以取少许液体培养基进行菌检，待合格后再使用。
9. 过滤后的培养基液体应立即使用或存放于玻璃瓶、培养基瓶（PET）或具有隔氧涂层的一次性储液袋中，2-8℃避光保存，此时液体培养基保质期为1年。
Neurobasal-A神经元干粉培养基注意事项
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及口罩操作；
2. 为保持本产品的最佳使用效果，请务必按照建议的储存条件进行保存；
3. 产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗。
Neurobasal-A神经元干粉培养基常见问题
Q：单独的 Neurobasal-A培养基或添加了 B-27 添加剂的 Neurobasal 培养基能否冷冻以延长产品保质期？
A：不建议冷冻培养基，因为解冻时可能会形成沉淀；配方中的无机盐和氨基酸在温度波动时可能会从溶液中析出，这些沉淀一旦形成，就不容易再回到溶液中。
Q：我可以添加什么补充剂到Neurobasal-A培养基中来培养我的神经细胞？A：可以添加B-27补充剂（不含维A，PB180638）来培养神经干细胞；培养海马神经元和其他神经元细胞可添加B-27(含维A，PB180637）或N-2添加剂（PB180641)；用于原代胶质细胞、星形胶质细胞、星型胶质表型的肿瘤细胞系（星形胶质细胞和胶质瘤）的培养，可以使用G-5添加剂（PB180640）。
Q：Neurobasal-A干粉培养基制备液体培养基过程中需要控温多少呢？
A：溶解的温度控制在室温即可也就是20-30℃。
Q：Neurobasal-A干粉培养基为什么要额外添加碳酸氢钠，不能提前加在干粉里配制时直接溶解吗？
A：细胞培养基中的碳酸氢钠（NaHCO3）通常并不包含在干粉形式的培养基内，而是作为单独的成分，在配制培养基溶液的过程中另外添加。主要原因包括：1. 碳酸氢钠在一定条件下容易分解，并且对二氧化碳敏感，如果预先混入干粉培养基中，可能会影响其稳定性并导致有效成分失效。2. 由于不同实验室的二氧化碳浓度以及操作者配制时的具体条件（例如温度、时间）可能不同，因此在最终配制液体培养基时才加入碳酸氢钠，可以根据实际需求调整其浓度，以确保培养基达到理想的pH值。3. 将碳酸氢钠独立存储还可以方便运输和长期储存干粉培养基，因为碳酸氢钠受潮后可能引起结块，影响其溶解性能。