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从原理到实操，虾青素抗肝纤维化实验流程！（2）2025/4/17
2DMN（二甲基亚硝胺）诱导C57小鼠肝纤维化模型建立2.1原理二甲基亚硝胺（DMN）通过肝脏代谢生成甲基自由基，直接损伤肝细胞及肝窦内皮细胞，激活炎症反应（TNF-α、IL-6释放）和肝星状细胞（H...
从原理到实操，虾青素抗肝纤维化实验流程！（1）2025/4/16
1实验原理C57BL/6J小鼠可通过化学诱导（如二甲基亚硝胺DMN）建立肝纤维化模型。肝纤维化进展伴随以下病理特征：HSC活化→肌成纤维细胞增殖，分泌Ⅰ/Ⅲ型胶原。ECM失衡：基底膜胶原（Ⅳ型）被纤维...
如何解决细胞铺板不均匀的问题2025/4/15
细胞铺板不均匀会对实验结果的准确性和可重复性造成影响，解决这一问题可从实验前准备、铺板操作、后续处理等方面着手：实验前准备确保细胞状态良好：选用处于对数生长期、活力高且形态正常的细胞。比如培养HeLa...
细胞铺板具体操作及流程2025/4/14
细胞铺板是细胞实验中的基础操作，其目的是将细胞均匀分布在培养板上，以保证实验结果的准确性和可重复性。下面为你介绍详细操作流程：1.实验准备材料：细胞悬液、培养基、胰酶、PBS缓冲液、血清、96孔板或2...
蛋白磷酸化解决方案2025/4/11
创新磷酸结合标签GLPBIO的PHOS-TAG,一种创新的科研工具，可在中性PH条件下特异性捕获蛋白质丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸上的磷酸基团，不放过任何一个氨基酸的磷酸化!深入探究蛋白质世界PHOS-TA...
为何你的平板“空空如也”？感受态细胞转化的这几个小细节你注意到了吗？2025/4/9
1.前言在分子克隆实验中，感受态细胞转化是基因克隆的基础步骤之一。但相信很多同学在涂板后，常常会出现平板上菌落稀少甚至“空空如也”的尴尬局面，这不仅耽误我们的实验进度，还会消耗宝贵的试剂和时间。实验为...
细胞凋亡-早期凋亡检测的优选2025/4/8
Annexinv-PE/7-AADApoptosisDetectionkit-早期凋亡检测的优选红色荧光标记可与绿色荧光实现共染适用范围:悬浮细胞、贴壁细胞保存条件：2-8°C保存产品概述在正常细胞中...
细胞凋亡-更亮、更稳定的红色荧光2025/4/8
抗淬灭因子高活性重组TdT酶,保证荧光掺入效率适用范围:细胞样品、石蜡切片、冰冻切片保存条件：-20°C保存；BrightRedLabelingMix避光储存于-20°C产品概述本试剂盒采用TUNEL...
细胞凋亡--绿色荧光检测凋亡2025/4/7
TUNELFITCApoptosisDetectionKit绿色荧光检测凋亡绿色荧光标记适用范围：细胞样品、石蜡切片、冰冻切片保存条件：-20°C保存；FITC-12-dUTPLabelingMix避...
细胞死亡的三种方式以及俩种凋亡细胞的检测方法（Tunel、Annexin V）2025/4/1
细胞死亡动物细胞的死亡主要有三种方式：细胞凋亡、细胞坏死和细胞自噬。目前对动物细胞凋亡的特征、机制和生物学功能的研究较为深入。细胞凋亡也被称为程序性细胞死亡(programmedcellDeath,P...
分子克隆实验---第三章：测序结果解读2025/3/31
一代测序是克隆实验中常见的下游实验。现代DNA测序技术源于Sanger链末端终止测序法，其工作原理与Sanger测序不同的是4组反应的双脱氧核苷酸分别用不同的荧光分子标记，每个试管的产物在光激发下发出...
分子克隆实验的流程及注意事项--四、定点突变2025/3/24
四、定点突变定点突变引物设计与PCR扩增1.引物设计要求：5’-15-21bp反向互补区域+至少15bp非互补区域-3’，反向互补区域GC含量40%-60%，待突变位点至引物3’端Tm值60°C。根据...
分子克隆实验的流程及注意事项--三、同源重组2025/3/19
本方法适用于总长度（载体+所有片段）不超过20kb的重组实验。目的片段引物设计与PCR扩增1.2.1.引物同源臂设计要求：15-20bp(不计算酶切位点)，GC含量40%-60%；根据实验需求选择对应...
分子克隆实验的流程及注意事项--二、TOPO克隆2025/3/18
二、TOPO克隆引物设计与PCR扩增1.目的片段PCR扩增引物合成时，要求引物5’端不可磷酸化修饰；2.建议使用高保真酶进行目的片段的PCR扩增，并摸索退火温度，优化反应体系和程序。PCR产物的纯化回...
分子克隆实验的流程及注意事项--一、酶切连接2025/3/17
一、酶切连接一般来说，限制性内切酶的选择非常重要。建议从以下方面判断选择：1.限制性内切酶的识别序列在目的载体中存在且只有一个，在目的片段中不存在；2.尽量选择酶切产物为粘性末端、酶切效率高的限制性内...
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