ATCC培养基是微生物培养中常用的标准化培养基，其操作需严格遵循规范，以确保实验结果的准确性和可重复性。以下是操作时的关键注意事项：
一、培养基的选择与配制
1.明确培养基类型
根据微生物种类和实验目的选择合适的ATCC培养基配方。
注意培养基的pH值、渗透压和营养成分是否符合目标微生物的需求。
2.严格按配方配制
使用精确的电子天平称量试剂，避免称量误差。
溶解试剂时充分搅拌，确保完*溶解。
调节pH值至规定范围，避免过酸或过碱。
3.灭菌处理
液体培养基需高压灭菌，固体培养基需先灭菌后倒平板。
灭菌后立即使用或在无菌条件下保存，避免污染。
二、ATCC培养基操作注意事项：
1.无菌操作
在超净工作台或生物安全柜中进行接种、倒平板等操作，避免杂菌污染。
使用无菌器械，每次使用前需灼烧灭菌。
操作过程中避免说话、咳嗽或大幅移动，减少空气流动导致的污染。
2.接种规范
接种前确保微生物培养物处于对数生长期或适宜阶段。
控制接种量，避免过量导致菌落重叠或过少导致生长不良。
涂布平板时用力均匀，确保菌液均匀分布。
3.培养条件控制
根据微生物需求设置温度、气体环境和湿度。
倒置培养平板，避免冷凝水滴落冲散菌落。
三、ATCC培养基储存与有效期：
1.储存条件
未开封的培养基应存放在阴凉干燥处，避免光照和高温。
已配制的培养基需密封保存，防止吸潮或污染。
2.有效期管理
固体培养基平板应在4℃保存，最好在24~48小时内使用，避免干燥或污染。
液体培养基开封后需尽快使用，避免变质。
四、常见问题与解决
1.污染问题
若培养基出现霉菌、杂菌斑点，需检查无菌操作是否规范，器械是否灭菌彻*。
定期清洁超净工作台和实验区域，使用消毒剂（如70%乙醇）擦拭台面。
2.菌落异常
菌落形态、大小不一致：可能因接种量不均或培养基pH偏差，需重新配制培养基并规范操作。
菌落稀少或无生长：检查培养基配方、灭菌是否充分、微生物活性是否良好。
3.培养基干裂
固体培养基平板在长期培养后可能干裂，可通过加盖保湿或缩短培养时间改善。
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