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TC含量检测试剂盒的使用
时间：2023-2-14
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总胆固醇(TC)含量检测试剂盒的原理：
TC 包括游离胆固醇和胆固醇酯，TC 是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇 (FC) 和游离脂肪酸 (FFA)，从而把胆固醇酯 转化为 FC；进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC 氧化，生成△4-胆甾烯酮和 H2O2；最后利用过氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚，生成红色醌类化合物；在 500nm 有特征吸收峰，其颜色深浅与 TC 含量成正比。
总胆固醇(TC)含量检测试剂盒操作步骤:
一、TC 的提取:
1、组织中TC 的提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:510的比例(建议称
取约0.1g 组织，加入1mL 试剂一)进行冰浴匀浆，8000g 4℃离心10min，取上清，即
TC待测液。
2、 细胞、细菌中TC 的提取:先收集400-500万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加1mL
试剂一，超声波破碎1min(强度20%，超声2s，停1s)，8000g4℃离心10min，取上
清，即TC 待测液。
3、 血清(浆)等样品:直接测定。
二、测定操作:
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到500nm，蒸馏水调零。
2. TC 工作液置于37℃水浴30min。
3.标准管:在1mL玻璃比色皿中依次加入50μLTC 标准品和150uLTC 工作液，混匀。
静置24h 后于500nm处比色，记为A标准管。
4.测定管:在1mL 玻璃比色皿中依次加入50μLTC 待测液和150μLTC 工作液，混匀，
静置24h后于500nm 处比色，记为A测定管。
注意:标准管只需测定一次。