皖仪科技离子色谱助力医疗健康诊断
尿路结石的成分较为复杂,多数为草酸钙、磷酸钙、磷酸镁铵等,如果这些结晶在尿液中的饱和度过高,则易发生析出、沉淀、结聚,以形成尿石。尿路结石中最常见的成分为草酸钙,而在碱性尿液中,则极易形成磷酸钙或磷酸镁结石。由此可见,尿路结石的形成与尿液中阴阳离子的含量密切相关。目前,测定尿液中的阴阳离子有滴定法,该方法操作复杂,受干扰因素较多,结果不准确。而离子色谱法操作简单、快速、方便,测定结果准确、可靠。
本文主要介绍采用双通道离子色谱仪,同时分析尿液中的钠离子、铵根离子、钾离子、镁离子、钙离子、氯离子、磷酸根离子、硫酸根离子、草酸根离子的方法。对于阴离子可在10分钟内完成分析,阳离子在12分钟内完成分析,简便、快速,结果准确,特别适合于临床大批样品分析。这对诊断和治疗结石病有很重要的意义。
1 实验部分
1.1 主要仪器与试剂离子色谱仪
皖仪科技离子色谱仪IC6600,配备电导检测器;
阴离子抑制器;
阳离子抑制器;
自动进样器;
皖仪离子色谱工作站;
阴离子分析柱:150 mm×4 mm,填料为树脂;
阳离子分析柱:250 mm×4 mm,填料为树脂;
保护柱:皖仪诺谱HS-5AG(50 mm×4 mm);
电子天平0.1mg(220g),赛多利斯(Sartorius),B224S;
Cl– 、C2O42 – 、SO42–、PO4 3–、Na+、NH4+、K+、Mg2+、Ca2+标准溶液:质量浓度均为1 000 μg/mL,安谱公司;
实验用水为皖仪科技超纯水净化器制备,电阻率为 18.2 MΩ · cm(25 ℃)。
1.2 溶液配制
精确移取 Cl– 、C2O42 – 、SO42–、PO4 3–标准溶液分别置于不同的容量瓶中,用超纯水定容至刻度线,摇匀,配制成4种阴离子的质量浓度均为适合样品检测的混合标准工作溶液。同理配制Na+、NH4+、K+、Mg2+、Ca2+五种阳离子混合标准溶液。具体浓度范围见表1。
标准曲线系列浓度表(mg/L)
1.3 仪器工作条件
阴离子分析柱:150 mm×4 mm;
色谱柱温度:40 ℃;
电导池温度:45 ℃;
淋洗液:5.0mM Na2CO3+2.0mM NaHCO3溶液;
等度淋洗;
流量:1.5 mL/min ;
抑制器电流:50 mA ;
进样体积:10 μL。
阳离子分析柱:
250 mm×4 mm;
色谱柱温度:40 ℃;
电导池温度:45 ℃;
淋洗液:20mM MSA;
流量:1.0 mL/min ;
抑制器电流:60 mA ;
进样体积:10 μL。
1.4 样品的预处理
将尿液样品过两次0.22μm的水系滤膜,稀释30倍,直接进样分析。
2 结果与讨论
2.1 标准曲线与线性范围
按照表1所需浓度配制混合标准工作曲线。在色谱条件1.3下进样检测,同时记录色谱图。得到阴阳离子标准色谱图如图1、2、3所示。
图1
图2
图3
由图可知,目标阴阳离子峰形对称,各组分分离度良好,线性相关系数均大于0.999,线性良好。
2.2 样品结果
在 1.3仪器工作条件下,对1.4处理后的样品进行检测。典型样品离子色谱图如图4、图5所示。可见样品中相关阴阳离子峰形对称,分离度良好。
图4
图5
3 结论
采用皖仪科技离子色谱6600系列配置电导检测器,建立离子色谱法测定人尿液中的阴阳离子。尿液样品过滤膜后稀释,经离子色谱柱分离,采用标准曲线定量。该方法操作简便,分析快速、灵敏度高、选择性好、结果准确,满足测定要求,可用于人尿液中相关阴阳离子的检测,为医疗诊断提供良好地数据支持。
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