皖仪科技液相色谱

测定食物中四环素、土霉素，助力食品安全

1 前言

四环素类(TCs)是由链霉菌产生或半合成的碱性广谱抗生素，在20世纪40年代末首次被发现。在当时，TCs是一种很好的快速抑菌剂，甚至在高浓度下也有杀菌作用。抗菌谱广，可有效对抗多种革兰氏阳性和阴性细菌、立克次体、支原体、螺旋体等，早在六七十年代就被广泛使用。其中金霉素、四环素、土霉素因其广谱、使用方便、经济等，在畜禽生产中被广泛用作药物添加剂，用于防治禽畜肠道感染和促进生长。

但四环素类兽药易残留于动物组织、鱼、蛋、牛奶和蜂蜜等生物样本中，当人长期食用含有四环素类兽药残留的食物后，TCs会不断在体内蓄积，当浓度达到一定量后，就会对人体产生毒性作用。所以，对食物中四环素类抗生素的监控检测很有必要。本篇介绍的是用皖仪科技液相色谱仪检测土霉素、四环素的一种应用方法。

皖仪科技液相

2 方法原理

本方法参考的是GB 31658.6-2021标准，高效液相色谱-紫外法测定，外标法定量。

3 仪器配置及实验方法

3.1 仪器配置

        皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列

3.2 实验方法

n  3.2.1 试剂和标准品制备

标准储备液：精确称取标准品土霉素、四环素各适量，用甲醇溶解配置成1mg/mL的标准储备液。

混合标准工作液：分别量取土霉素、四环素标准储备液各100uL，用800μL甲醇稀释至1mL，配制成100μg/mL混合标准工作液。

标准曲线制备：精密量取混合标准工作液适量，用草酸溶液（0.01mol/L）稀释成浓度为0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、5μg/mL、10 μg/mL、20 μg/mL的系列混合标准液。

草酸溶液（0.01mol/L）：取草酸1.26 g，用水溶解并稀释至1000mL。

三氟乙酸溶液：取三氟乙酸0.8mL，用水溶解并稀释至1000mL。

n  3.2.2 色谱条件

4 实验结果

4.1 线性

               图1 土霉素标曲

               图2 四环素标曲

由上图可知，土霉素曲线R值为0.99997，四环素曲线R值为0.99976，完全满足实验要求。

4.2 检出限

根据上图数据所示，浓度为0.1mg/L的标准品，三倍信噪比为检出限计算可知土霉素仪器检出限为0.02mg/L，四环素仪器检出限为0.032mg/L。

4.3 重复性

               图4 6针重复性谱图

根据上表数据计算可知，土霉素保留时间RSD为0.057%，峰面积RSD为0.042%。四环素保留时间RSD为0.064%，峰面积RSD为0.047%。

5  总结

本篇介绍的分析方法，采用皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列配置紫外检测器测试土霉素、四环素。实验结果显示：土霉素、四环素线性良好，R值均在0.999以上。土霉素仪器检出限为0.02mg/L，四环素仪器检出限为0.032mg/L。土霉素保留时间RSD为0.057%，峰面积RSD为0.042%。四环素保留时间RSD为0.064%，峰面积RSD为0.047%。以上各项数据结果满足标准方法中对仪器的要求。