凝胶色谱仪是一种基于体积排除原理进行分离分析的仪器，以下是关于凝胶色谱仪的原理、操作与应用的全面解析：

　　原理

　　凝胶色谱仪，又称体积排阻色谱仪，其原理是利用多孔性凝胶作为固定相，根据溶质分子尺寸的不同进行分离。当样品溶液通过凝胶柱时，大分子因不能进入凝胶的小孔而被排阻，只能沿着凝胶粒子之间的空隙通过，因此最先流出；而小分子则能进入凝胶的小孔中，路径较长，所以流出时间较晚。这种分离机制使得凝胶色谱仪能够有效地根据分子大小对样品进行分级。

　　操作

　　凝胶色谱仪的操作步骤包括溶剂准备、样品准备、凝胶柱安装、洗脱与收集等。在溶剂准备阶段，需使用HPLC纯溶剂，并进行过滤和脱气处理。样品准备时，需过滤样品以确保不含固体颗粒，并用流动相溶解。凝胶柱的安装需严格遵循操作规程，防止气泡进入。洗脱过程中，需设定合适的流速和洗脱剂，以收集不同时间段的流出物。

　　应用

　　凝胶色谱仪在多个领域有广泛应用，如材料科学、化学、化学工程等。它可用于测定高聚物的相对分子质量及分子量分布，还可用于多肽、蛋白质、生物酶等生物分子的分离分析。此外，凝胶色谱仪还可用于食品安全分析和质量控制，如食品成分的分子量测量。

　　综上所述，凝胶色谱仪以其的分离机制和广泛的应用领域，成为科学研究和工业生产中的重要仪器。