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精品啪啪一级免费视频 人脂肪干细胞永生化细胞专用培养基传代

时间:2025/5/15阅读:85
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精品啪啪一级免费视频 人脂肪干细胞永生化细胞专用培养基传代 

1) 当细胞汇合度达到 85%以上时,可进行传代。

2) 在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,收集瓶内的培养基;

3) 向培养瓶内加入 3ml 无菌的 1×PBS 后,水平放置培养瓶,使PBS 能够浸润到培养瓶底面上所有的面积,吸弃 PBS;

4) 向瓶内加入消化液 1ml,浸润底面后放入 37℃ CO2培养箱中孵育 1~2min;

5) 孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,若全部消化下来则直接向培养瓶内加入2ml 含 10%FBS 的培养基中,将悬液吸入 15ml 离心管;

① 准备一个无菌的 15ml 离心管,加入 2ml 含 10%FBS 的培养基;

② 将消化下来的细胞吸入①中的离心管内中和(避免吹打③);向之前消化的培养瓶中加入 1ml 继续消化 2min 左右,轻拍培养瓶,95%左右细胞脱。

6) 1000rpm 离心 5min;

7) 准备两个新的 T-25 培养瓶,各加入 4ml培养基。

8) 离心完成后,弃上清,用 2ml 培养基重悬离心细胞,将重悬后的细胞转入 2 个 T-25 培养瓶,每个培养瓶各 1ml;

9) 水平放置培养瓶,震荡混匀后,将培养瓶置于 37℃,5%CO2培养箱中静置培养。 


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