细胞STR鉴定FAQ[Frequently Asked Questions(常见问题解答)]
1.什么是细胞系鉴定?
所谓细胞系鉴定即通过STR(短串联重复)图谱所建立细胞系的遗传特征。一株细胞系的遗传特征确立后,细胞系可以通过定期的检测,以防止出现细胞系被误认或交叉污染的情况。
2.为什么要进行细胞系鉴定?
由于细胞系发生交叉污染或身份误认,将导致实验数据的无效或数据误导。NIH已发出公告,讨论细胞系鉴定的必要性与重要性,并且越来越多的的期刊要求文章发表前、需提供细胞鉴定数据。
3. 细胞系用错的概率有多大?
据ATCC估计,1977年错误使用细胞的概率是16%,1999年是18%。根据我们的经验,国内细胞系用错的概率不低于20%。即如果一个研究所有二十个课题组,按概率估计,有4个课题组用的细胞是错的。
4. 什么细胞最容易污染别的细胞?
Hela细胞。因为她长得快、长得好嘛。当你发现自己的一个培养瓶里的细胞突然长得很好,而以后都用它传代做实验的话,十之八九是搞错了。
5. 有哪些细胞曾被Hela污染?
lnt-407、HEp-2、WISH等一百余种。.
6. 如何进行细胞系鉴定
细胞系鉴定目前主要基于国际身份认证委员会的标准。依据该标准,可以通过多重荧光PCR技术,对人源8个STR位点以及1个性别决定位点进行检测。下表为这些位点的具体的遗传信息。
7. 什么时候需细胞系鉴定?
(1)当建立或获得一个新的细胞系时;
(2)一个涉及到细胞试验项目开始/结束时
(3)在细胞冻存之前,或细胞已连续培养2~3个月
(4)发表文章或申请课题经费前
(5)细胞系表现不稳定或结果与预期差别较大时
(6)当实验室使用超过一种细胞系时,所有细胞系最好先鉴定以排除交叉污染的可能
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