精品啪啪一级免费视频 MicroSnap菌落总数检测拭子使用方法

MicroSnap菌落总数检测拭子组成：

1.         MicroSnap TOTAL增菌拭子，货号：MS1-TOTAL。

2.         MicroSnap TOTAL检测拭子，货号：MS2-TOTAL。

说明与用途：

MicroSnap TOTAL（细菌总数检测拭子）是一种快速生物发光检测方法，用于对不同种类样品中的细菌总数进行检测和计数，检测结果可以在7小时内获得。MicroSnap TOTAL 由一支带有特定生长培养基的增菌拭子和一支带有生物发光试剂的检测拭子所组成，对目标菌所产生的生物标记信号（光子）可通过配套的便携式EnSURE荧光仪来测定。

检测需分两个步骤，首先采用增菌拭子进行短时间的孵育来促进细菌的生长，然后用检测拭子进行测定。在增菌拭子孵育期间，细菌数量会增加，而潜在的样品干扰会被降低。细菌生长过程中会产生具有酶活性的生物标记物，细菌数量越多，所产生的生物标记物浓度越高，发出的光也越多。将增菌后的样品转送至检测拭子中，经过拭子的激活、混合步骤后在荧光仪上进行测量。光的输出量与生物标记物的浓度和所存在细菌的数量呈正比。

MicroSnap TOTAL细菌总数检测拭子可用于检测环境表面、各类产品样品、水以及其它可过滤液体样本等。

需要但不提供的材料：

l   30±1℃的孵育器

l   EnSURE荧光仪

l   稀释液，例如：

Ø 缓冲蛋白胨水（BPW）

Ø 最大恢复稀释液（MRD）

Ø 磷酸盐缓冲液（Butterfields）

Ø 用户选择的其它验证过的稀释液

l   采样袋

l   搅拌器

    表1：动态范围（检测限）：

    若某些样品的污染超出了表1中所列的范围，则必须进行以下的梯度稀释才可在荧光仪上读数：

l   1%悬液为1000-500,000 CFU

l   0.1%悬液为10,000-5,000,000 CFU

l   注意：当检测多个梯度稀释时，必须同时准备和检测所有的稀释液以获得线性结果。

说明：

步骤1：增菌

增菌程序如下描述并可参照图表的步骤1.

1. 采集样品并放置于MicroSnap TOTAL增菌拭子中（MS-E-TOTAL）。

       样品可以是：

i.         表面——涂抹4X4英寸（10X10厘米）的平面，对于不规则表面则尽可能大面积地采集有代表性的样品。

ii.        液体——1ml液体食物、饮料或水样可直接加到增菌拭子中。

iii.      产品——1ml合适的悬液，例如将10% W/V（重量/体积）食物匀浆直接添加到增菌拭子中。食物匀浆的准备应按照标准微生物程序执行。对于未知的样品污染，应准备低于10% 的稀释液进行检测。

注意：当进行对比实验时，两种方法的样品分析必须在10分钟内开始以获得可比性结果。

2. 将拭子重新插入拭子管中，恢复刚从拭子袋中取出时的样子。

3. 紧握拭子管并用拇指和食指前后弯曲球阀，折断顶部的Snap-Valve阀来激活拭子。

4. 轻提球阀（大约1~2英寸）以释放内压，然后挤压球阀将所有培养基释放到拭子管底部，确保大部分的增菌肉汤集中在拭子管底部。

5. 将拭子重新插入拭子管中并旋紧密封。

6. 轻轻地摇晃管子，将样品和增菌肉汤充分混合。

7. 在30±1℃温度下孵育7个小时± 10分钟。

步骤2：检测

检测程序如下描述并可参照图表的步骤2。在开始步骤2之前，先开启EnSURE荧光仪。若已经编程了检测位，可选择出要检测的检测位。

1. 将MicroSnap TOTAL（MS-TOTAL100）检测拭子从冷藏条件下取出后室温放置10分钟。将拭子在手掌上轻拍5次或向下用力地敲打一次，使提取液流到管子底部。

2. 将增菌后的样品从增菌拭子中转移到检测拭子中。增菌拭子可用作移液管，方便使用。

i.         挤压并释放增菌拭子的球阀，使样品吸回到球阀中。

ii.        将增菌拭子从管子中取出。

iii.      通过扭动并抽出球阀将检测拭子打开，然后放在一边待用。

    a. 将增菌拭子的拭子头插入检测拭子管中（大约1英寸或3厘米），然后轻轻挤压增菌拭子球阀将增菌样品慢慢滴入管中直到容量达到检测拭子管上标记的填充线。避免添加样品超过填充线，因为这可能增加检测结果的变量。

iv.      剩余的增菌样品可以返回到增菌拭子中用于其它检测。将增菌拭子重新装配至原始状态并放置于孵育器中。

    注意：当检测来自同一增菌样品的重复样品时，所有的重复品必须在10分钟内进行以获得可比性的结果。

v.       将检测拭子重新装配至原始状态。

3. 紧握拭子管并用拇指和食指前后弯曲球阀，折断顶部的Snap-Valve阀来激活检测拭子。挤压球阀3次以释放所有的液体到拭子管底部。

4. 轻晃管子使其充分混合。

5. 立即将整个拭子插入荧光仪中，关闭盖子并保持直立，按下OK键开始测量。倒数15秒出结果。

6. 荧光仪显示屏上为RLU（相对光单位）读数，在荧光仪上设置符合所要求的CFU限值的RLU临界值。参照以下“结果判定”对应表换算出CFU数值。

结果判定：

EnSURE荧光仪显示的结果是相对光单位（RLU）。RLU值与初始接种菌量呈正相关，并可与细菌数量（菌落形成单位，CFU）进行换算。下面表2中给出了RLU值与CFU值的对应关系。