精品网站在线免费观看 A0500-3010胎牛血清使用步骤说明

A0500-3010胎牛血清使用步骤说明

胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）是由胎牛血凝集而成的液体组分，不含细胞、纤维蛋白和凝血因子，但含有大量细胞生长所必需的营养因子和大分子因子。牛血清白蛋白是牛血清蛋白的主要成分。胎牛血清中的生长因子对培养细胞的维持和生长是需要的。FBS还含有各种小分子，如氨基酸、糖、脂和激素。

胎牛血清的主要用途之一是真核细胞培养，其浓度高达20%甚至更高，可提供许多促进细胞存活和增殖的必需营养和生长因子。然而，要注意到，人类细胞培养中的胎牛血清可能会引入人工制品；用人血清培养的人细胞与用胎牛血清培养的人细胞的行为不同。FBS还用于人类和兽用疫苗以及生物技术药物的研究、制造和控制，并用于阻止胰蛋白酶消化或作为低温保存的保护剂。

1.血清解冻

建议将血清从冰箱先移至2-8℃冰箱解冻，不宜在较高温度下进行解冻，解冻温度较高会导致血清浑浊、沉淀增加、品质下降等问题。解冻过程中需要轻轻摇晃混合，严禁将血清直接放在37℃长时时间孵育解冻。

如您是储存在-80℃的血清，需提前几天转移至-20℃冰箱中(至少24小时)，使用前转移至4℃冰箱中缓慢融化，融化过程中需不定期多次缓慢轻柔摇动瓶身使血清混匀，摇晃过程中避免剧烈摇晃产生泡沫。

2.血清浓度

原则上血清添加量不要太多，通常分为5%、10%、20%几档，部分细胞原代提取时会使用20%血清，大部分细胞正常培养时会使用10%的血清浓度。至于某一株细胞适应什么样的血清浓度，还需要根据细胞特性、实验目的做测试和调校。

3.血清热灭活

血清热灭活是为了去除补体，补体是免疫系统的一部分，在体内可通过多条途径被激活，从而发挥调理吞噬裂解细胞、介导炎症、免疫调节和清除免疫复合物等多种作用。如果不涉及以上实验，可以不进行血清热灭活。

4.血清试用：

血清开始进行试用时，如果是重新复苏细胞，建议用原培养体系进行细胞复苏，待细胞状态进入状态后再进行测试。测试时不建议直接100%直接换成新血清体系进行培养，而应该按照比例进行梯度替换(例如，换液按照新旧体系1:3，第二次换液1:1，第三次换液3:1，而后替换。对于一些对培养体系比较敏感的细胞，可以进一步优化替换比例。)通过这种方法可以避免细胞因环境改变而出现应激或者异常造成不必要的损失。

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