在利用大肠杆菌进行蛋白制备的实验或生产过程中,大肠杆菌的裂解是获取蛋白质的关键步骤。
大肠杆菌原核表达蛋白时,如果用超声仪超声破菌,会遇到两个问题:1.超声功率太大或时间太长,目的蛋白被破坏掉,跑电泳会看不到目的条带。2.超声功率不够或超声时间不够,导致获得的目的蛋白量很少。
赛尔瑞成的两款大肠杆菌破菌液就很好的解决了这个问题,有很多老师反馈,破菌率比超声仪破菌要高。赛尔瑞成大肠杆菌破菌液让大肠杆菌原核表达更简单、高效!
一、大肠杆菌专用破菌液(货号:PR0202)
产品优势
1. 节省成本 只需将菌体与破菌液简单混匀,然后冻融即可,不需要超声仪就能使菌体破碎,释放可溶上清。节省仪器成本和人力成本。(注意:1.一定要混匀,2.一定要冻结实)
2. 组成成分温和 不含还原剂、强变性剂、离子型去污剂等烈性成分,对绝大多数蛋白结构和活性无影响。
二、 裂析超级破菌液(货号:PR0502)
产品优势
1. 高效温和:无需超声、冻融或溶菌酶,高效裂解同时保护目标分子活性。
2. 操作极简:只需混匀和离心(具体操作见下图),无需复杂设备或优化参数,节省时间和成本。
特性 | 传统超声/均质破菌 | 传统冻融破菌 | 溶菌酶破菌 | 赛多培®大肠杆菌专用破菌液 | 裂析TM超级破菌液 |
操作简便性 | 依赖昂贵设备(超声仪、均质机)操作复杂,参数优化耗时 | 需反复冻融,耗时较长 | 无需设备,溶菌酶可能残留在产物中,需额外纯化步骤,否则可能干扰后续实验(如质谱分析或酶活性测定)。 | 无需设备,直接冻融离心,操作简便 | 无需设备,无需冻融离心,操作极简 |
蛋白质保护 | 高温和剪切力易导致蛋白质变性 | 反复冻融可能导致蛋白质失活 | 能有效保持目标蛋白的天然活性。 | 成分温和,最大限度保护蛋白质活性 | 成分温和,最大限度保护蛋白质活性 |
破菌效率 | 高效,但需优化参数 | 效率较低,适合脆弱细胞 | 高浓度菌体或存在抑制剂(如培养基成分)可能降低效率。 | 高效裂解,适用于多种大肠杆菌菌株 | 高效裂解,适用于多种大肠杆菌菌株 |
适用场景 | 适合大规模样品处理 | 适合小规模实验 | 适合小规模实验 | 适合小规模实验 | 适合小规模实验和大规模处理,灵活性强 |
成本 | 设备成本高,维护费用高 | 成本较低,但效率也低 | 大规模生产时,酶的使用成本显著上升。 | 成本低,性价比高 | 成本较低,性价比高 |
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