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单细胞分离不理想，您需要了解新的技术和技巧
阅读：271 发布时间：2022-8-18
如今，单细胞多组学分析正在如火如荼地开展，各大杂志上不断有重磅的新成果发表。也许您也跃跃欲试，不过在此之前，您需要分离出单细胞。
您理想中的单细胞分离是不是快速而高效的，而现实中的过程也许是低效而漫长的。在此，我们将介绍一些新的细胞分离技术并分享一些操作时的小技巧。
细胞分离的挑战：
准备分离单细胞的研究人员必须克服许多挑战。他们希望获得纯正的目标细胞群，且细胞的各种特征都保持不变。如何才算不错的分离方法？它应当保持细胞活力，提供足够数量的细胞，并且可根据未来的需求而扩展。它还能够防止细胞聚集，并且操作起来相对简单，费用也不太高。
新兴的微流体技术：
与传统的FACS相比，新型微流体细胞分选仪具有不少优势。它们使用较低的分选压力，降低了SICS的风险。它们所需的样本量也较少，可将样本加入一次性的微流体芯片中进行分选。基于微流体芯片的细胞分选仪的优势不仅在于处理微升级的样本。近年来，微流体技术已与其他学科整合在一起，进一步加强单细胞分离。
单细胞分离的小技巧：
1、缩短制备单细胞悬液的时间，以保留细胞活力；
2、考虑使用细胞筛来过滤出细胞团块或双细胞；
3、注意缓冲液的选择，包括分选和收集溶液；
4、如果您打算在分选后培养细胞，请使用对数生长期的细胞，并确定理想培养条件；
5、在分选转染后的细胞时，通常在转染后72小时进行，以提高细胞群的生存能力；
6、如果采用荧光抗体来分离稀有细胞，请在染色前离心抗体，以便去除任何可能被误认为是靶细胞的荧光颗粒；
7、对于单细胞分离，在分选后别忘了离心平板，以确保细胞在孔的底部；
8、选择一种可靠的分析技术来评估分选细胞的数量和质量。