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这样进行单细胞分离实际操作更有效
阅读：264 发布时间：2022-9-8
目前，单细胞多组学分析正在如火如荼地进行着，在各大杂志上发表了一些重磅的研究成果。也许你也很想尝试一下，但是在那之前，你需要把单细胞分离出来。理想状态下的单细胞分离速度快、效率高，而实际操作可能效率低、时间长。从异质细胞群体中分离单细胞主要有人工分离、荧光激活细胞分选和微流控技术三种方法。当然，除了成熟的方法外，还不断涌现出新的精确度和特异度分离的新方法。
如果您想要的细胞在悬浮状态中含量相对较高，流式分选是您理想的选择。如果样本为实体组织，则可将胶原蛋白及其它细胞外蛋白质分解。但是酶消化对细胞的影响很大，甚至可能改变基因的转录状态。将组织细胞制成悬液后，利用荧光标记进行细胞分离。再进一步获得单细胞就比较困难了，可能需要借助微流体设备。
1.为了保持细胞活力，缩短单细胞悬液制备时间
2.考虑使用细胞筛过滤细胞团块或双细胞。
3.注意选择包括分选和收集溶液的缓冲液。
4.如果您打算在分选后进行细胞培养，则使用对数生长期细胞，并确定最佳培养条件。
5.转染细胞的分选通常在转染后72小时进行，以便提高细胞群的存活率
6.如果用荧光抗体分离稀有细胞，染色前应将抗体离心，以除去任何荧光颗粒，这些荧光颗粒可能会被误认为是靶细胞。
7.就单细胞基因组应用而言，不要忘记在分选之后将平板离心，以确保细胞位于孔底。
8.选择用于评估分选细胞数量和质量的可靠分析技术。