当前位置:深圳市安培生物科技有限公司>>技术文章>>精品视频一区二区三区 共表达抗原的工作
抗原间的相互关系分为三种,分别是互斥关系、子代与亲代的关系和共表达关系。
互斥关系是指两种抗原不会同时表达在一中细胞上,即表达A不表达B,表达B不表达A。配色时,互斥的抗原是允许荧光溢漏的。
子代与亲代关系是指抗原之间是上下级关系,即下级抗原是在上级抗原的基础上进行分析的。
共表达关系是指两种抗原同时表达在一种细胞上。配色时,共表达抗原要搭配荧光干扰较小的荧光素,尽量避免荧光溢漏。
什么样的抗原属于共表达抗原呢?以Treg细胞为例,Treg细胞同时表达CD25和Foxp3,那么CD25和Foxp3就属于共表达关系。在这种情况下,CD25和Foxp3需要搭配相互之间没有溢漏的荧光素,比如搭配APC和PE,因为这两个荧光素是几乎没有干扰的,因此可获得预期的数据结果。
在多色流式实验中,如果两个共表达Marker使用的荧光染料之间干扰较严重,则会对圈门造成干扰,影响实验结果的准确性。虽然我们也能通过调节补偿来减少光谱重叠的影响,但对被干扰通道荧光灵敏度降低的影响是无法通过后续的结果分析来消除的。
图2. 荧光干扰的影响
如果共表达抗原之间有严重荧光干扰会怎么样呢?那结果就可能出现如上图右所示的情况,虽然进行了补偿调节,但得到的目的细胞的比例跟实际有差别。
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