2000型氨基酸分析仪通过离子交换色谱与柱后茚三酮衍生技术，可实现食品、生物样本中17种常见氨基酸的高精度定量分析。本文以蛋白质样品检测为例，系统梳理其操作步骤与关键注意事项。

　　一、样品前处理：水解与衍生化

　　1.蛋白质水解

　　称取100 mg蛋白质样品置于水解管中，加入10 mL 6N盐酸及3-4滴苯酚，抽真空至0 Pa后充入高纯氮气，重复三次后封口。

　　在110°C恒温干燥箱中水解24小时，冷却后过滤并定容至50 mL。取1 mL滤液于60°C真空蒸发至干，用0.02N盐酸稀释至200 μg/mL，经0.22 μm滤膜过滤后备用。

　　2.游离氨基酸处理

　　对于血清等液体样品，直接用4%磺基水杨酸按1:3比例混合，4°C、10000 rpm离心15分钟，取上清液稀释至200 μg/mL并过滤。

　　二、仪器准备与校准

　　1.开机与检查

　　启动仪器电源，检查氮气压力（0.05-0.1 MPa），确保缓冲液（A、B、C、D）及茚三酮溶液余量充足。

　　若仪器闲置超过1个月，需用吹风机对进样盘及衍生模块除湿，并更换进样针清洗液（10%甲醇水）。

　　2.参数设置

　　通过EZChrom Elite软件建立分析序列，设置进样体积为20 μL，柱温58°C，流速0.45 mL/min。

　　配置梯度洗脱程序：0-10分钟用缓冲液A（pH 2.2），10-30分钟线性切换至缓冲液B（pH 3.3），30-50分钟切换至缓冲液C（pH 4.0）。

　　三、样品分析与数据采集

　　1.进样与检测

　　将标准品与样品按顺序放入自动进样器，启动序列运行。仪器自动完成离子交换分离、柱后茚三酮衍生（115°C反应）及光度检测（570 nm主波长，440 nm副波长）。

　　2.数据处理

　　通过软件校准保留时间，删除杂质峰并添加目标峰，输入样品总量（mg）及稀释度。

　　生成报告时，系统自动计算氨基酸浓度（μmol/L）及回收率（95%-105%），支持导出Excel或PDF格式。
 

　　四、维护与故障排除

　　1.日常维护

　　每日用超纯水清洗泵及反应管路，每周更换色谱柱保护柱芯，每月校准仪器线性度（R2≥0.999）。

　　2.常见问题处理

　　若基线漂移，检查茚三酮溶液是否氧化（需现配现用）；若峰形拖尾，清洗离子交换柱（用0.1N NaOH冲洗30分钟）。

　　2000型氨基酸分析仪通过标准化操作流程，可实现ppb级检测限与±1% RSD的重复性。从样品水解到数据输出，每一步均需严格遵循参数设置与质量控制要求，以确保分析结果的准确性与可靠性。