1范围

本标准规定了 食品中霉菌和酵母 (moulds and yeasts)的计数方法

本标准第一法适用于各类食品中霉菌和酵母的计数,第二法适用于番茄酱罐头、番茄汁中霉菌的计数。

2设备和材料

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：

• 2.1 培养箱：28°C士1°C。

• 2.2 拍击式均质器及均质袋。

• 2.3电子天平：感量 0.1g。

• 2.4 无菌锥形瓶：容量 500 mL。

• 2.5 无菌吸管：1 ml（具0.01ml,刻度）、10 ml（具0.1 ml.刻度）。

• 2.6 无菌试管：18 mm × 180 mm。

• 2.7 旋涡混合器。

• 2.8 无菌平四：直径 90 mm。

• 2.9 恒温水浴箱：46°C士1°。

• 2.10 显微镜：10倍~100倍。

• 2.11 微量移液器及枪头：1.0 ml。

• 2.12 折光仪。

• 2.13 郝氏计测玻片：具有标准计测室的特制玻片。

• 2.14 盖玻片。

• 2.15 测微器：具标准刻度的玻片。

操作步骤

5.1 样品的稀释

5.1.1 固体和半固体样品：称取25g样品，加人 225 ml. 无菌稀释液(蒸馏水或生理盐水或磷酸盐缓冲液），充分振摇，或用拍击式均质器拍打 1min~2min,制成1：10的样品匀液。

5.1.2 液体样品：以无菌吸管吸取25mL 样品至盛有225 mL 无菌稀释液(蒸馏水或生理盐水或磷酸盐缓冲液)的适宜容器内(可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)或无菌均质袋中，充分振摇或用拍击式

均质器拍打 1 min~2 min.制成1：10的样品匀液。

5.1.3 取1ml1：10样品匀液注人含有9 mL 无菌稀释液的试管中,另换一支1mL 无菌吸管反复吹吸，或在旋涡混合器上混匀，此液为 工：100 的样品匀液。

5.1.4 按5.1.3操作,制备 10 倍递增系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1支1ml 无菌吸管。

5.1.5 根据对样品污染状况的估计，选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液)，在进行10倍递增稀释的同时，每个稀释度分别吸取1ml 样品匀液于2个无菌平四内。同时分别取1 ml

无菌稀释液加人2个无菌平皿作空白对照。

5.1.6 及时将20 mL~25ml- 冷却至46°C 的马铃薯葡萄糖琼脂或孟加拉红琼脂（可放置于 46°士

1°C恒温水浴箱中保温，倾注平四，并转动平皿使其混合均匀。置水平台面待培养基基本凝固。

5.2 培养

琼脂凝固后，正置平板，置28°C士1°C培养箱中培养，观察并记录培养至第5d的结果。

5.3 菌落计数

用肉眼观察，必要时可用放大镜或低倍镜，记录稀释倍数和相应的霉菌和酵母菌落数。以菌落形成单位(colony-forming units, CFU)表示。

选取菌落数在 10 CFU~150 CFU 的平板,根据菌落形态分别计数霉菌和酵母。霉菌蔓延生长覆

盖整个平板的可记录为菌落蔓延。

6结果与报告

6.1结果

6.1.1 计算同一稀释度的两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数。

6.1.2 若有两个稀释度平板上菌落数均在 10 CFU~150 CFU 之间，则按照GB 4789.2的相应规定进行计算。

6.1.3 若所有平板上菌落数均大于 150 CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多

不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。

6.1.4 若所有平板上菌落数均小于 10 CFU,则应按稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数计算。

6.1.5 若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,则以小于 1乘以稀释倍数计算。

6.1.6 若所有稀释度的平板菌落数均不在 10 CFU~150 CFU 之间,其中一部分小于 10 CFU 或大于

150 CFU 时，则以 10 CFU 或 150 CFU 的平均菌落数乘以稀释倍数计算。

6.2 报告

6.2.1 菌落数按“四舍五人”原则修约。菌落数在 10以内时，采用一位有效数字报告;菌落数在 10~

100 之间时,采用两位有效数宇报告。

6.2.2 菌落数大于或等于 100 时,前第了位数字采用“四舍五人”原则修约后，取前2位数字,后面用。

代替位数来表示结果;也可用10 的指数形式来表示,此时也按“四舍五人”原则修约,采用两位有效数字。

6.2.3 若空白对照平板上有菌落出现,则此次检测结果无效。

6.2.4 称重取样以CFU/g 为单位报告,体积取样以 CFU/mL 为单位报告，报告或分别报告霉菌和/或

酵母数。

• ZSH-150F生化培养箱

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